单选题
煮沸法从表达内切核酸酶A的大肠埃希菌菌株中小量制备质粒时,不应省掉的步骤是
A.溶菌酶处理
B.PEG处理
C.DNA聚合酶催化
D.酚—氯仿抽提
E.胰蛋白酶处理
A
B
C
D
E
【正确答案】
D
【答案解析】
煮沸法不能完全灭活核酸内切酶A,在Mg
2+
存在下温育质粒DNA可被降解。若要避免这一问题,可以在用70%乙醇洗涤前增加一步用酚氯仿进行抽提,可以抑制酶的活性。
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