问答题 什么是cDNA文库(complement DNA library)?同基因组文库有何差别?
【正确答案】同mRNA互补的DNA称为cDNA。cDNA文库是以某一生物的总mRNA为模板,在无细胞系统中,在反转录酶的作用下,首先合成一互补的DNA,即第一链,破坏RNA模板后,再以第一链为模板合成第二链,得到的双链DNA称为cDNA。选用适合的载体,将合成的cDNA重组导入寄主细胞,经筛选得到的cDNA克隆群称为cD-NA文库。由于cDNA技术合成的是不含内含子的功能基因,因此是克隆真核生物基因的一种通用方法。
   由于细胞内的基因在表达的时间上并非是统一的,具有发育的阶段性和时间性,有些则需要特殊的环境条件。所以,cDNA文库是不可能构建得十分完全的,也就是说,任何一个cDNA文库都不可能包含某一生物的全部编码基因。
   cDNA文库与基因组文库的主要差别是:
   (1)基因组文库克隆的是任何基因,包括未知功能的DNA序列;cDNA文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因,包括调节基因。
   (2)基因组文库克隆的是全部遗传信息,不受时空影响;cDNA文库克隆的是不完全的编码DNA序列,因它受发育和调控因子的影响。
   (3)基因组文库中的编码基因是真实基因,含有内含子和外显子;而cDNA克隆的是不含内含子的基因。
【答案解析】