问答题 试题分析举例
分离生化蛋白酶的主要步骤和结果如下表:
分离步骤 分离液体积/mL 总蛋白含量/mg 总活力单位/IU
①离心分离 1400 10000 100000
②硫酸铵盐析和透析 280 3000 96000
③离子交换层析 90 400 80000
④亲和层析 6 3 45000
问题:
1.根据上述结果,计算②至④步骤中每步骤的比活力和纯化倍数?
2.亲和层析的原理是什么?
【正确答案】需要首先计算出粗酶(第①步)的比活:100000/10000=10(IU/mg) 第②步产品的比活:96000/3000=32(IU/mg) 纯化倍数:32/10=3.2 第③步产品的比活:80000/400=200(IU/mg) 纯化倍数:200/10=20 第④步产品的比活:45000/3=15000(IU/mg) 纯化倍数:15000/10=1500
【答案解析】