问答题 解释核酸的变性和复性,并举例说明分子杂交在核酸研究中的应用。
【正确答案】天然核酸在某些物理及化学因素(如过酸、过碱、过热、加变性剂)作用下,双螺旋区因氢键断裂变成单链,紫外吸收升高,黏度下降,生物活性全部或部分丧失。这种现象称为核酸的变性。在适当条件下,DNA变性后的两条分开的核苷酸链可以靠氢键重新结合成为双螺旋,使其物理、化学及生物活性得到恢复,这便是核酸复性。 通过核酸的变性和复性操作,可使两条来源{{U}}不同{{/U}}、但有碱基序列互补关系的DNA单链分子之间或DNA单链分子与RNA分子之间,在互补区段形成双链DNA分子或DNA/RNA异质双链分子,即核酸的分子杂交。分子杂交在分子生物学研究中用途广泛。 如DNA印迹。是一种利用分子杂交原理鉴定DNA的方法。技术要点是:将DNA样品进行限制性内切酶处理,并用琼脂糖凝胶电泳将不同长度的DNA进行分离,然后将DNA变性并原位转移至滤膜,与带有标记的核酸探针(已知序列)进行杂交反应,从而使能与探针互补的DNA片段得到检测。DNA印迹可用来鉴定不同物种间是否存在同源基因,或鉴定转基因生物是否已有外源基因的整合,也可用于鉴定同一生物某一基因的拷贝数。 (或以RNA印迹为例。RNA印迹在操作过程中也利用了核酸的变性、复性原理,常用来在mRNA水平研究基因的表达规律。)
【答案解析】