【正确答案】正确答案：PCR特异性的主要决定因素包括：①引物与模板DNA特异正确的结合。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的，是特异性的关键因素；②碱基配对原则；③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性：聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度；④基因的特异性与保守性：通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。 在实践中可以通过如下措施来提高特异性：①升高退火温度可增加引物与模板结合的特异性；②缩短退火和延伸时间，可减少错误引发及多余的DNA聚合酶分子参与酶促延伸的机会；③降低引物和酶的浓度也可以减少错误引发，尤其能减少引物聚体的引发；④改变Mg ²⁺ 的浓度可进一步提高扩增的特异性，其机制可能是通过提高反应的严谨性，直接影响聚合酶的活性；⑤引物设计的特异性；⑥减少循环次数，太多的循环数将会增加非特异性产物的产量；⑦改进方法以提高特异性：热启动，这能使引物在较高温度下与模板退火，提高了反应的严谨性，使扩增更特异；采用两对引物即外引物和为引物进行扩增以提高其特异性。