问答题 (华中农业大学2010年考研试题)从一植物的抽提物中发现了比较理想的抗病毒活性,现欲确定属哪类生物大分子,请运用已学到的生物化学知识设计一套实验方案,并简明写出理由。
【正确答案】正确答案:由于抗病毒活性是生物大分子,可以排除其他更多种类的小分子。常见的生物大分子包括蛋白质、核酸、脂质、糖类,而核酸不可能有抗病毒活性,一般可以排除。要确定属于蛋白质、脂质、糖类中哪类生物大分子,关键是将各类物质提取分离纯化,然后分别做抗病毒活性检测,找出哪类生物大分子具有抗病毒活性。 蛋白质的提取分离纯化:稀盐溶液和缓冲液是提取蛋白质常用的溶剂,离心后蛋白质存在于水层。然后用聚丙烯凝胶电泳对蛋白质提取液进行分离纯化,最后检测其是否具有抗病毒活性。 脂质的提取分离纯化:非极性脂质(三酰甘油,蜡和色素等)可用乙醚,氯仿和苯等提取,膜脂可用乙醇或甲醇提取,组织用氯仿:甲醇:水(1:2:0.8)匀浆,再加入过量水,离心后脂质存在于下相氯仿层。然后用气液色谱分析的方法将提取到的脂质分离纯化,最后检测其是否具有抗病毒活性。 糖类的提取分离纯化:往脱脂后的抽提物中加入水溶液提取糖类,可以用层析法除去无机盐及小分子物质杂质,可以酶降解然后沉淀除去蛋白质。然后用离子交换层析法将得到的糖类提取液进行分离纯化,最后检测其是否具有抗病毒活性。
【答案解析】