问答题 蓝白斑筛选法为什么也会有假阳性?
【正确答案】β-半乳糖苷酶的N端是非必需的,可以进行修饰,并不影响酶的活性或α肽的互补性。如果插入的外源DNA引起α肽的可读框的改变,或者插入片段在正确的可读框中含有终止密码的话,就会形成白色噬菌斑。如果插入DNA的碱基数正好是3的倍数,或者插入的DNA中不含有终止密码的话,仍然会形成蓝色噬菌斑。这种插入物的长度可达几百个碱基对。M13载体的这种性质可以用来检测和选择产生新的终止密码或改变可读框,即移码突变。
【答案解析】