问答题 Cohen S N于1973年构建了三个重组体,pSC102、pSC105、pSC109,请说明这三个重组体是如何获得的?各说明了什么?
【正确答案】pSC 102:用EcoR Ⅰ切割R 6-5,混合转化大肠杆菌,在卡那霉素抗性平板上选择了一个克隆,并从该克隆中分离了重组质粒DNA,命名为pSC102。该质粒是由质粒R6-5的EcoR Ⅰ酶切片段Ⅲ、Ⅴ和Ⅷ在体内连接的,说明可以利用体内连接构建重组体。
   pSC 105:作者分别用EcoR Ⅰ切割质粒pSC 101、pSC 102,然后加入DNA连接酶进行连接后转化大肠杆菌,在四环素和卡那霉素双抗性的平板上筛选到pSC 105。说明用质粒作为载体,体外连接可得到有功能的重组体。
   pSC 109:pSC 101与RSF 1010的共整合,即用EcoR Ⅰ分别切割这两个质粒,然后在体外进行重组。说明两个独立的复制子体外重组后仍具有生物功能。
【答案解析】