问答题
(吉林大学2009年考研试题)凝胶过滤层析法分离蛋白质的原理是什么?肌红蛋白、过氧化氢酶、细胞色素C、肌球蛋白、糜蛋白和血清蛋白的分子量分别为:16900、247500、13370、524800、23240和68500,指出从凝胶过滤层析柱上洗脱这些蛋白质的顺序。
【正确答案】正确答案:凝胶过滤层析的原理是,当不同分子量的蛋白质混合物流经层析柱时,比凝胶网孔大的分子不能进入珠内网状结构中,而被排阻在凝胶珠之外,随着溶剂在凝胶珠之间的孔隙向下移动并最后流出柱外;而比网孔小的分子能不同程度地自由出入凝胶珠的内外。这样由于不同大小的分子所经的路径不同而得到分离,大分子先被洗脱出来,小分子后被洗脱出来。 从凝胶过滤层析柱上洗脱这些蛋白质的先后顺序是:肌球蛋白、过氧化氢酶、血清蛋白、糜蛋白酶、肌红蛋白、细胞色素C。
【答案解析】