【答案解析】由于粗提液中不同的蛋白质具有不同的等电点，利用蛋白质在等电点时溶解度最低的原理，可以把蛋白质混合物分开。首先通过酸碱调节粗提液的pH到5.3附近，此时α-半乳糖苷酶和蛋白质3大部分被沉淀下来，等电点低于或者高于5.3的蛋白质仍然留在溶液里。
盐析作用是指当离子强度增加到足够高时，很多蛋白质可以从水溶液中沉淀出来这种现象。α-半乳糖苷酶和蛋白质3盐析的盐浓度有差异，可采取盐析的方法进行分离。重新调节pH使得蛋白质混合物溶解，然后通过硫酸铵调节其浓度为45%，这个时候大部分α-半乳糖苷酶就会析出沉淀。
最后通过凝胶过滤的进行脱盐，纯化和浓缩，由于α-半乳糖苷酶分子质量最大，所以将一些杂蛋白根据分子质量大小的原理除去。