问答题
(武汉大学2005年考研试题)在分离纯化一种新酶时,获得如下的数据:纯化步骤总蛋白量(mg)(总)活性(units)①粗提取液200004000000②盐析50003000000③再沉淀(调节pH)40001000000④离子交换200800000⑤亲和层析50750000⑥凝胶过滤45675000(1)从上表给出的信息,计算该酶每个纯化步骤的比活;(2)对该酶的纯化来说,哪个纯化步骤是最有效的?其依据是什么?(3)哪步纯化程序是最无效的?(4)经过这6步纯化后,你认为该酶是否已被纯化?用什么样的方法可以鉴定它的纯度?
【正确答案】正确答案:(1)步骤①的比活是200units/mg;步骤②的比活是600units/mg;步骤③的比话是250units/mg:步骤④的比活是4 000units/mg;步骤⑤的比活是15 000units/mg;步骤⑥的比活是15000units/mg。 (2)步骤④。 (3)步骤③。 (4)是,因为步骤⑥的比活没有再升高;用SDS-PAGE可以检测。
【答案解析】