结构推理
假如某一种哺乳动物有A和B两种细胞,其中A细胞只比B细胞多表达一种蛋白质X,你如何快速地得到蛋白质X的cDNA。
【正确答案】
(1)提取A细胞的总mRNA,以总mRNA作为模板制备总cDNA。
(2)提取B细胞的总mRNA。
(3)将A细胞的总cDNA与B细胞的总mRNA进行杂交,因为B细胞不表达X基因,因而只有X基因的cDNA没有相应的mRNA杂交。这使得只有X基因的cDNA保持单链状态。
(4)使用羟基磷灰石可以将呈单链状态的X基因的cDNA与其它的cDNA分开。
【答案解析】
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