结构推理 叙述乳糖(lac)操纵子的组成、功能及其调控机制。
【正确答案】1.操纵子:几个功能相关的结构基因连同其上游的调控成分,称为一个操纵子,是原核生物转录单位。 2.lac操纵子调控机制: (1)组成及功能 ①结构基因(S):有三个,分别为Z、Y、A,为利用lac的三种酶(β-半乳糖苷酶、通透酶、乙酰基转移酶)编码。 ②启动子(P):由转录起始点、识别部位、结合部位组成,是RNA-pol与DNA结合的位点。 ③操纵序列(O):位于结构基因与启动子之间,阻遏蛋白(物)可与操纵序列结合,此处是控制基因转录的“闸门”。 ④调控基因(I):此基因可表达,其产物是阻遏蛋白。 ⑤CAP结合位点:CAP(分解代谢物基因激活蛋白)分子内有DNA结合区及cAMP结合位点。当CAP与cAMP结合后,通过分子内DNA结合区与基因的CAP结合位点结合,使转录活性提高50倍。 (2)调控机制 阻遏蛋白的负调控: ①当无乳糖存在时,调控基因表达生成阻遏蛋白,并与O序列结合,阻碍RNA-pol与P序列结合,操纵子处于关闭状态。 ②当有乳糖存在时,lac操纵子可被诱导而开放。有乳糖时,乳糖经通透酶催化,进入细胞,由原存在于细胞中的少数β-半乳糖苷酶催化,转变为半乳糖。半乳糖作为诱导剂与阻遏蛋白结合,使蛋白质构象改变,而与O序列解离,基因开放。 CAP的正性调节: 阻遏蛋白的负调控解释了单一因素变化时,操纵子的调控机制。但细菌的生长环境是复杂的,当G与lac并存时,细菌首选G作为能源,而不是lac。其机理是:当有G存在时,细胞内cAMP浓度低(因G代谢产物能抑制细胞内腺苷酸环化酶和激活磷酸二酯酶,结果细胞内cAMP生成减少,分解加快,水平降低),CAP与cAMP结合受阻,影响CAP与DNA上CAP结合位点的结合,使Lac操纵子表达下降。当没有G时,cAMP水平较高,cAMP与CAP结合,并与启动子附近的CAP位点结合,刺激RNA转录活性,使之提高50倍。 协调调节: 在lac操纵子中,lac启动子是弱启动子,RNA-pol与之结合的能力很弱,只有当CAP结合到启动子上游的CAP位点后,促进RNA-pol与启动子结合,才能有效转录。lac操纵子的转录起始是由CAP和阻遏蛋白两种调控因子来控制的。阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控机制,根据存在的碳源性质,及cAMP的水平协调调节lac操纵子的表达。
【答案解析】