问答题
Mn2+、Mg2+对DNase Ⅰ(deoxyribonuclease Ⅰ)的活性有什么影响?DNase Ⅰ在基因工程中有什么作用?
【正确答案】DNase Ⅰ是一种内切核酸酶,在Mg2+存在下,DNase Ⅰ随机切割DNA两条链中的任意一条链;当Mn2+代替Mg2+时,DNase Ⅰ几乎是在双链DNA两条链相对的位置上打开缺口,使双链DNA断裂,产生的末端几乎是平末端或只突出1~2个核苷酸的DNA片段。
DNase Ⅰ有许多用途:①在切口移位标记中制造切口;②在足迹法中保护DNA;③除去RNA制备物中的DNA;④体外转录中除去DNA模板;⑤检测染色体中的转录活性区;⑥产生可在噬菌体M13载体上进行测序的随机克隆。
【答案解析】