问答题
5SrRNA基因的表达需要TFⅢA,这个转录因子包含有9个锌指区,它与5SrRNA基因的内部区域以及5SrRNA本身结合。
【正确答案】分离出一段含有5S基因的限制性片段。用多聚核苷酸激酶标记两个5'-末端,用限制酶切除一个标记末端。将纯化的TFⅢA结合到DNA上,接着用DNA酶处理,在凝胶上分析切出的产物。由于蛋白质与DNA结合使这一区域的DNA免于被消化,从而确定出蛋白质结合位点。确保一个不加蛋白质的对照,预先确定好DNA酶Ⅰ的用量。
【答案解析】
【正确答案】突变了哪个残基会消除锌结合?
【答案解析】
【正确答案】这些氨基酸切除对DNA结合区无影响。转录因子还有别的功能活性区吗?这些别的功能区与哪些别的蛋白作用?
【答案解析】
【正确答案】TFⅢA在爪蟾卵母细胞中调控5SrRNA的积累,因为它能与5SrRNA基因和5SrRNA结合。当存在微量5SrRNA时,大部分TFⅢA与DNA结合,促进5S基因转录。随着5SrRNA水平的提高,TFⅢA结合到RNA上,使之不能转录,这是一种反馈调节的例子。
【答案解析】