结构推理
在用乙醇沉淀DNA时,通常加入醋酸钠或氯化钠,其最佳终浓度是多少?其作用是什么?
【正确答案】醋酸钠(NaAc)或氯化钠(NaCl)的最佳终浓度为0.1~0.25mol/L。
作用:(1)在pH为8左右的DNA溶液中,DNA分子是带负电荷的,加入一定浓度的NaAc或NaCl后,Na+可中和DNA分子上的负电荷,减少DNA分子之间的同性电荷排斥力,易于聚合而形成DNA钠盐沉淀。
(2)当加入的盐溶液浓度过低时,只有部分DNA形成DNA钠盐而聚合沉淀,造成DNA沉淀不完全。而当加入的盐溶液浓度过高时,在沉淀的DNA中,由于过多的盐杂质存在,影响DNA的酶切等实验,必须要进行洗涤或重沉淀。
【答案解析】