结构推理
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶是一种与动物体内磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶不同的酶。该酶催化的反应中不需要ATP,也不需要生物素的参与。但是这个酶的活性测定采用的是一种间接的方式,即将该酶的羧化反应与苹果酸脱氢酶催化的反应耦联,这样就使该酶的测定变得容易了。请指出磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的这种活性测定的生化基础。
【正确答案】磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶催化的反应是:磷酸烯醇式丙酮酸+CO2+H2O→草酰乙酸+Pi
苹果酸脱氢酶催化的反应是:草酰乙酸+NADH→苹果酸+NAD+
从上面的反应可以看出,由磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶催化产生的草酰乙酸可以被苹果酸脱氢酶定量转化成苹果酸,而这一定量转变导致NADH的定量氧化。因此,只要测定NADH在340nm处的光吸收减少量即可测定出磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的活性。
【答案解析】