结构推理 试述特导师性IgE测定的方法、原理及意义。
【正确答案】特异性IgE(specific IgE,sIgE)是指能与某种变应原特特结合的IgE。其测定方法通常可采用放射性变应原免疫吸附试验(RAST)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和CAP变应原检测系统(CAP system)。 RAST:将纯化的变应原吸附于固相载体上,加入待测血清及参考品,再与放射性核素125I标记的抗IgE抗体反应,最后测定固相的放射活性。放射强度越高,表示sIgE含量越高。 ILISA:测定原理与步骤与RAST相同,只是将放射性核素标记的抗IgE改为酶标记抗IgE,再加入底物,利用酶催化底显色来判断结果。 CAP system:是根据RAST原理设计的全自动检测血清sIgE的荧光固相免疫检测系统。检测时在吸附有变应原的载体CAP上,先加入待测血清和不同浓度的IgE标准品,经一定时间温育和冲洗,加入β-半乳糖苷酶标记的抗人IgE,使之与固定在CAP上的IgE结合。此酶作用于随后加入的底物4-甲基伞形酮-β-半乳糖苷,使之产生荧光,用荧光度计读取吸光值。荧光强度与sIgE呈线形关系。 SIgE的测定对I型超敏反应疾病的诊断有重要价值,也是体外检测变应原的重要手段。
【答案解析】