问答题
什么叫DNA多态性?DNA亲子鉴定是通过分析个体DNA中的“短串联晕复序列”即STR来确定二个体间是否存在亲子关系。说明STR鉴定的基本原理和实验方法。
【正确答案】正确答案:(1)DNA多态性是在染色体的某个基因座可能由两个或多个等位基因中的一个占据而造成的同种DNA分子的多样性。具有多态性的DNA分子在核苷酸序列上不同或在核苷酸重复单位的数量上有变化,可分为序列多态性和长度多态性。 DNA序列多态性是指一个基因座上,因不同个体DNA序列有一个或多个碱基的筹异而构成的多态性。DNA长度多态性是指同一基因座上各等位基因之间DNA片段长度差异构成的多态性。 (2)STR鉴定的基本原理。“短串联重复序列”(STR)是一类广泛存在于真核生物基因组中的DNA串联重复序列,它由2~6bp的核心序列构成,重复次数通常在15~30次,DNA片段长度为100~350bp,由于STR很容易通过PCR扩增、电泳分型,所以是目前常用的遗传标记,特别是应用于亲子鉴定等法医学领域有诸多优点:①STR在人类基因组中广泛分布,等位基因多,杂合度高;②STR扩增片段短,一般在100~350bp之间,扩增率高,灵敏度比传统的DNA指纹高得多;③各个STR位点扩增片段长度近似,扩增条件相似,可进行复合扩增;④STR核心序列重复单位少(2~6bp),Amp-FLP时不会造成小片段有限扩增错误,其稳定性是RFLP和VNTR不能比拟的:⑤检测方法简单省时,且易实现自动化、标准化。 (3)STR鉴定的实验方法:首先将样品在5%螯合树脂悬浮液中煮沸。离心后取上清提取DNA或直接PCR。PCR的模板DNA区域必须包括DNA的侧翼区序列。DNA总长度为100~400bp;进行多基因座同时扩增时,根据不同的基因座序列设计不同的特异引物。使用臼动荧光检测的电泳分离PCR产物。对PCR产物进行激光扫描,通过将参照物和DNA分子量标准(具有不同的颜色)进行同步电泳,并由计算机分析软件分析,对DNA片段进行很准确地测定,准确性通常能达到区分相差一个碱基对的片段。将扩增样本片段、等位基因阶梯和内标进行比较,从而达到分型的目的。
【答案解析】