结构推理 免疫荧光技术的原理和操作步骤如何?试与放射自显影技术相比较。
【正确答案】免疫荧光技术就是将免疫学方法(抗原-抗体特异结合)与荧光标记技术相结合,利用研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。其原理就是用荧光标记的抗体(或抗原)可以与待检测的抗原(或抗体)特异性结合,从而可以在荧光显微镜下检测到荧光,有荧光的位置就是目标抗原蛋白存在的位置。
   免疫荧光技术的基本步骤包括:荧光抗体的制备、标本的处理、免疫染色和观察记录等过程。其中,标本的处理有很多中方法,如组织切片、冷冻切片和整装细胞。但要尽可能地保持被检测蛋白的抗原性;免疫染色就是抗原-抗体反应的过程,应设立各种对照以保证实验结果的可靠性。
   免疫荧光技术主要采用荧光物质对抗体进行标记,实验安全、可靠且灵敏度高,是较为先进的蛋白质定位、定量研究技术,其主要研究对象是蛋白质性质的物质;而放射自显影技术是利用放射性核素对研究对象进行标记,其研究对象可以是生物体内的大部分生物大分子,对其进行放射性核素示踪研究这些生物大分子在细胞乃至生物体内的合成和分解动态,是免疫荧光技术无法比拟的。但是实验中使用的物质具有放射性,因此对实验操作有较高的要求,危险性大大增加。
【答案解析】