如何通过实验的方法分析CTD上S2和S5不同磷酸化模式的功能?
 
【正确答案】CTD是RNA聚合酶Ⅱ最大亚基末端的羧基端结构域,它是由以七氨基酸(Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser-)为重复单位的高度保守的重复序列组成的,磷酸化是CTD结构的一个非常重要的特点,Ser-2和Ser-5是氨基酸发生磷酸化的两个活跃位点。正是由于CTD结构中具有了这些可发生磷酸化的位点,所以才有了RNA聚合酶Ⅱ的两种不同类型RNAPⅡA和RNAPⅡO型,结构上的不同也直接影响了它们各自的功能:RNAPⅡA与mRNA转录起始的阶段有关,而RNAPⅡO则同转录的延伸过程有关。可以通过构建针对于S2和S5的磷酸化过程相关酶(TFⅡH、CDTK-I、Ser5P PPase)的特异性缺失突变体,检测mRNA转录过程以及mRNA形态的改变,进而检测不同的磷酸化模式的功能。
【答案解析】