（1）营养缺陷型（auxotroph）

营养缺陷型是指一种缺乏合成其生存所必需的营养物的突变型，只有从周围环境或培养基中获得这些营养或其前体物才能生长。

（2）得到X菌的his^-菌株的方法

①实验方法

选择影印平板的方法进行分离，因为营养缺陷型突变型在选择培养基（或基本培养基）上不生长，所以是一种负选择标记，故采用影印平板的方法进行分离最为合适。

②实验步骤

a．将待分离突变株的原始菌株以合适的稀释度涂布到野生型菌株和突变株均能生长的主平板（含完全培养基）上，经培养后形成单菌落。

b．通过一消毒的“印章”（直径略小于培养皿底，表面包有丝绒布，使其尽量平整）将（a）平板的菌落分别原位转移（或印迹）到（C）平板[含有与（a）平板相同的营养成分]和（d）平板（不含缺陷型所需的营养因子，即基本培养基）。

c．经培养后对照观察（c）和（d）平板上形成的单菌落，如果在（C）平板上长而在（d）平板上不长的，则为所需分离的突变型。

d．在（c）平板上挑取（d）平板上不长的相应位置的单菌落，并进一步在完全培养基上划线分离纯化。

③实验原理

由于营养缺陷型突变型在选择培养基（或基本培养基）上不生长，所以是一种负选择标记，故采用影印平板的方法进行分离。