(1)该蛋白经SDS-PAGE出现相对分子质量约为20000的单一条带,解释原因(2)设计试验进一步测定该蛋白的相对分子质量,简要写出实验思路

【正确答案】

sds-page称为sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳,它是一种变性电泳,SDS是蛋白质变性剂,它可以破坏蛋白质分子中的氢键和疏水作用,使蛋白质发生变性;

在β-筑基乙醇存在下,蛋白质二硫键断裂,多肽链充分伸展,SDS以其烃链与蛋白质分子的侧链通过疏水相互作用结合成复合,因此在sds-page下,蛋白质迁移速度只与分子质量有关,结果显示的是蛋白质亚基的分子质量。在本实验中,通过将相对分子质量约为80000的蛋白质进行sds-page仅出现了20000的单一条带,可以说叨该蛋白质可能是由四个相对分子质量都为20000的亚基构成

SDS-PAGE是变性电泳,可以用来鉴定蛋白质纯度。如果电泳结果是一条带,证明样品纯度达到电泳纯,但即使sds-page电泳胶上仅出现一个条带,也并不意味着样品仅含一种蛋白质,如果对该条带进行二维电泳,有可能分离出多个多肽链。因此可以将该蛋白质溶液制成活性样品,然后利用PAGE分析

蛋白质条带。因为PAGE为非变性电泳,多亚基纯蛋白应该为1条带,则证明该蛋白质由四个相同的蛋白质亚基组成,每个蛋白质亚基约为20000:如果电泳结果为多条,则证明不纯,则需要进一步对该蛋白质进行纯化,随后进行

page分析该蛋白质纯度,当纯化后仪有一个条带后进行sds-page分析,得以进一步测定该蛋白的相对分子质量。

【答案解析】