结构推理 简介DNA聚合酶I和Klenow大片断的结构和功能
【正确答案】DNA聚合酶Ⅰ的结构与功能:DNA聚合酶Ⅰ是由大肠杆菌polA基因编码的一种单链多肽蛋白,酶分子中包含一个双硫键和一个巯基,还含有锌离子,基本上是一个椭圆结构。占DNA聚合酶Ⅰ蛋白2/3的C端区域,相对分子质量68000,具有DNA聚合酶活性和3'→5'核酸外切酶活性,既可合成DNA又可降解DNA,保证DNA复制的准确性;占DNA聚合酶Ⅰ蛋白1/3的N端区域,相对分子质量35000,具有5'→3'核酸外切酶的活性,可作用于双链DNA,又可水解5'端或距5'端几个核苷酸处的磷酸二酯键。DNA聚合酶Ⅰ在DNA直接修复、除去冈崎片段5'端RNA引物方面有重要作用。
   Klenow大片段是用蛋白酶水解DNA聚合酶Ⅰ所得的大片段区域,具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'核酸外切酶活性,在基因工程中有广泛的应用,主要有:修复反应、制备平末端;标记DNA 3'突出末端;双脱氧末端终止法进行DNA序列分析;用于cDNA第二链的合成;定点突变中用于合成第二链;用引物延伸法制备单链DNA探针等。
【答案解析】