摘要
分析GasderminD蛋白对内毒素导致肺泡巨噬细胞焦亡的影响。方法 建立GSDMD蛋白低表达的MH-S 细胞株。分为野生型MH-S细胞组(WT)、转染空病毒载体的空白对照细胞组(NC)和GSDMD敲低MH-S细胞组(KD),分析焦亡刺激后GSDMD mRNA表达、GSDMD-NT表达、以及MHS细胞死亡率及炎症因子释放水平情况。结果 无焦亡刺激物处理、LPS+CTB、LPS+NIG情况下KD组蛋白mRNA表达量均低于WT组和NC组(P0.05);接受LPS+ CTB的KD组激活状态下的GSDMID蛋白N端片段表达量均低于WT组、NC组,经过LPS+NIG焦亡刺激后,KD组蛋白表达量均低于WT组和NC组(P0.05);经过细胞焦亡诱导物刺激后,LDH水平明显升高﹐KD组LDH水平显著低于WT组和NC组(P0.05)。焦亡诱导下,3组细胞IL-1β水平均较对照组明显上升。KD组细胞接受LPS+CTB刺激后,IL-1β明显低于WT组、NC组(P0.05);KD组细胞接受LPS +nigericin刺激后,IL-1β水平明显低于WT组、NC组(P0.05)。结论 通过对MH-S细胞GSDMD蛋白表达进行下调,对抑制LPS导致的MH-S细胞焦亡,IL-1β释放具有极大地促进作用。
