摘要
以纯化的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)作为抗原免疫BALB/C系小鼠,通过细胞融合和克隆筛选出稳定分泌BVDV抗体的杂交瘤细胞株,将杂交瘤细胞接种于BALB/C系小鼠的腹腔内诱生腹水,腹水单抗与BVDV均呈阳性反应。将5A9、2G3和5C2(分别结合不同的抗原结合位点)诱生的BVDV单抗纯化后等量混合包被酶标板,与鸡抗BVDV IgY(检测抗体)联合应用,建立BVDV抗原捕捉ELISA(AC-ELISA)方法。采用方阵滴定法确定单抗、鸡抗BVDV IgY的最适工作浓度,用阴性组织样品作为判定检测结果的D490临界值,最后以建立的AC-ELISA检测临床粪样棉拭子27份,结果表明:该方法敏感性、特异性高,与全血病毒分离结果的符合率达86.36%;与全血和粪样RT-PCR检测结果的符合率分别为89.47%和94.74%。阴性对照RT-PCR、病毒分离和AC-ELISA检测均为阴性。
The monoclonal antibodies(McAbs) against bovine viral diarrhea virus(BVDV) were generated by immunization of BALB/C mice with purified BVDV,produced ascites monoclonal antibodies by inoculate intraperitoneally in BALB/C mice.These McAbs could react with BVDV.The McAbs 5A9,2G3 and 5C2(it s combind different antigen combined site)were mixtured,along with chichen anti-BVDV egg yolk antibodies(IgY),to develop the antigen-captured ELISA(AC-ELISA) for detecting BVDV antigen directly from clinical feces samples.De...
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第9期1004-1007,共4页
Chinese Journal of Veterinary Science
基金
国家成果转化资金资助项目(03EFN21610266)
新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室开放课题资助项目(05KL09)
