摘要
利用RT-PCR扩增H1N1亚型猪流感病毒HA基因,亚克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建分泌型重组表达载体pPIC9K-HA。将线性化的pPIC9K-HA电转化毕赤酵母菌GS115。将经MD平板筛选和PCR鉴定的阳性菌株用G418筛选多拷贝重组子。最后用1%甲醇诱导表达重组子,经SDS-PAGE和Western-blot检测,H1N1亚型猪流感病毒HA基因在毕赤酵母中成功得到了表达,产物约60.4KD,并具有免疫活性。本研究为进一步研究猪H1N1亚型猪流感病毒HA基因的功能及检测方法奠定了基础。
出处
《湖北畜牧兽医》
2013年第9期5-8,共4页
Hubei Journal of Animal and Veterinary Sciences
基金
湖北省研究与开发项目(2010BBB008)
湖北省农业科技创新中心资助项目(2011-620-001-003)
动物胚胎工程与分子育种湖北省重点实验室开放课题项目(2011ZD153)
