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鸡减蛋综合征病毒分离株AA-2基因组Hind Ⅲ酶切部分片段的分子克隆 被引量:9

Molecular Cloning of Hind Ⅲ Fragments of Egg Drop Syndrome Virus Genome
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摘要 以非免疫鸭胚增殖的减蛋综合征病毒(EDSV),经差速离心法纯化,电镜下观察到病毒无囊膜,大小为70~85nm。以蛋白酶K法抽提病毒基因组,琼脂糖凝胶电泳只出现1条分子量约34kb、背景清晰的核酸带。HindⅢ酶切EDSVDNA可见10条片段,以pUC19质粒为载体,采用鸟枪法对病毒基因组的HindⅢ酶切片段进行分子克隆,获得17个重组质粒,通过酶切、斑点杂交鉴定,证实已经成功地克隆到EDSV的5.24kb、2.02kb、1.65kb、1.47kb、1.41kb等5个DNA片段。 By using different rate centrifugations, egg drop syndrome viruses(EDSV) were purified from allantoic fluids of duck embryos inoculated with the EDSVstrain AA-2. Under electron microscope,the round virus particles were without envelopand calculated to be 70~85 nm in size.Viral DNA was extracted and purified,a clearband of about 34 kb in the agarose gel electrophoresis was found.The viral genomicDNA digested with Hind Ⅲ and showed 10 fragments.EDSV DNA Hind Ⅲ fragmentswere inserted into the Hind Ⅲ site of pUC19 by shot gun method and 17 recombinantplasmids were obtained. The recombinants were identified by digestion with Hind Ⅲand dot blot hybridization and 5 fragments of EDSV DNA in sizes of 5.24 kb,2.02 kb,1.65 kb,1.47 kb,1.41 kb respectively had been successfully cloned.The physicalmaps of the cloned framents are being studied.
出处 《中国兽医学报》 CSCD 1996年第3期244-247,共4页 Chinese Journal of Veterinary Science
关键词 EDSV 克隆 斑点杂交 EDSV clone dot blot hybridization
  • 相关文献

参考文献4

二级参考文献10

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共引文献33

同被引文献34

引证文献9

二级引证文献35

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