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人源肝癌单链抗体(scFv)基因真核表达载体的构建和表达

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摘要 目的:构建人源肝癌单链抗体(scFv)基因真核表达载体pSectag2/scFv并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中获得表达。方法:利用噬菌体细胞内重组技术筛选得到了肝癌特异性scFv,用PCR技术及核酸内切酶技术将其克隆入真核表达载体pSectag2,构建重组载体pSectag2/scFv,测序鉴定后,电转染CHO细胞,利用SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白的表达情况。结果:将750bp人源肝癌scFv插入真核表达载体pSectag2,经DNA测序鉴定正确,成功构建了pSectag2/scFv。将pSectag2/scFv转染CHO细胞后获得目的蛋白表达。SDS-PAGE和Western blot检测表明目的蛋白Mr约为34000。结论:成功地构建抗scFv真核表达载体pSectag2/scFv,并在CHO细胞中获得表达,为人源肝癌scFv的进一步的应用研究提供依据。
作者 李丙所 马龙洋 周红兵 党军强 任彦顺 窦科峰
机构地区 第四军医大学西京医院肝胆外科
出处 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期493-494,共2页 Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology
基金 国家自然科学基金资助项目(30571828)
关键词 肝癌 单链抗体 CHO细胞 基因表达
分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]
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共引文献1

细胞与分子免疫学杂志
2008年 第5期

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