摘要
目的建立高效的人皮肤成纤维细胞的原代培养和体外连续培养体系,为组织工程皮肤真皮的构建提供充足的种子细胞。方法取临床无菌切除的幼儿包皮,利用Ⅱ型胶原酶分离表皮和真皮,再用胰蛋白酶消化,剪碎真皮,接种于培养瓶,加少许含10%胎牛血清的高糖-DMEM培养液进行培养,次日补加培养液。原代长满后,进行传代,并对所培养的细胞进行形态学观察及免疫荧光鉴定。结果接种次日倒置镜下可见有长梭形细胞迁出、生长,3~4d进行传代,传代后3d长满,可长期传代。细胞免疫荧光检测,Vimentin表达阳性。结论该方法可快速高效获得构建组织观察皮肤真皮所需的成纤维细胞。
出处
《广东医学》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第12期1969-1970,共2页
Guangdong Medical Journal
基金
广东省自然科学基金资助项目(编号:06301387)