摘要
目的:克隆bcr/abl融合基因融合位点基因片段。方法:以慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞株总RNA作为模板,采用RT-PCR方法扩增包含Bcr/abl(b3a2)融合位点基因片段。将RT-PCR物按正确的阅读框架,定向克隆到pEGFP-N3的下游,将重组质粒转化大肠杆JM109大肠杆菌,用PCR初筛,将PCR扩增阳性的重组子用EcoR和BamH双酶切鉴定,并进行序列的测定。结果:扩增出470bp的Bcr/abl融合位点基因片段,构建重组质粒pEGFP-bcr/abl,酶切产物的大小分别与预期相符。结论:成功地扩增bcr/abl融合位点基因片段及构建真核表达重组质粒pEGFP-bcr/abl,为在体外表达重组bcr/abl蛋白奠定基础。
出处
《临床医药实践》
2009年第10期730-731,共2页
Proceeding of Clinical Medicine
基金
山西省自然科学基金资助项目(课题编号:20051104)
