摘要
从地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)构建的重组质粒pAmy413,经过定点诱变,在α-淀粉酶基因的271位引入G取代原来的A,构建成突变型质粒pAmy413C。成熟的α-淀粉酶氨基酸由+2Asn变为+3Asp,其产量是野生型的2.02-2.57倍;N-端氮基酸序列分析发现:信号肽酶I的切割位点前移了一个氨基酸,即AlaAla-+3Asp;二级结构分析发现:在自由能为-51.7kcal时,突变型与野生型的mRNA都形成14个环状结构,区别在于271位的G不再与211位的U配对,形成G突出;蛋白质二级结构分析发现:33-37氨基酸的转角结构减少了1个氨基酸,这个氦基酸参与形成α-螺旋;这些空间结构和荷电氮基酸的变化有利于蛋白质的分泌。
基金
国家自然科学基金