摘要
采用EST结合RACE技术进行了曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)sigma-型GST(SmGST)基因的克隆。结果表明,该基因的cDNA全长为838bp,其中5′非编码区为73bp,3′非编码区为150bp,开放阅读框为615bp,编码的蛋白含有204个氨基酸。该基因的氨基酸序列中包含1个典型的GST-N结构域和一个GST-C结构域,与栉孔扇贝和长牡蛎的sigma-型GST的相似度分别为40.3%和39.3%。将该基因的编码区重组到pET-21(a+)载体后在大肠杆菌中得到诱导表达。重组SmGST的GST活力为(12.22±0.92)U/mg蛋白。
The sigma-like glutathione S-transferase in Sepiella maindroni was cloned by EST and RACE method. The full sequence was of 838bp, containing an open reading frame （ORF） of 615bp, that encoded 204 amino acid residues and a 3＇ untranslated region of 150bp and a 5＇ UTR of 73bp. The deduced amino acid sequence of this gene showed 39.3%-- 40.3% identity to the sequences of the sigma-class GSTs from Chlamysfarreri and Crassostrea gigas. This gene was ex- pressed in Escherichia coli with the pET-21（a＋） vector. The GST activity of the recombinant SmGST was （12.22±0.92）U/mg Drotein.
出处
《海洋与湖沼》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期488-492,共5页
Oceanologia Et Limnologia Sinica
基金
国家自然科学基金项目资助
41176124号
41206114号
教育部博士点基金资助
20103305110003号
浙江省自然科学基金重点项目资助
Z3110482号
浙江省自然科学基金项目资助
LQ12C19002号
关键词
曼氏无针乌贼
谷胱甘肽硫转移酶
分子克隆
重组表达
Sepiella maindroni
glutathione S-transferase
molecular cloning
recombinant expression
