摘要
目的:研究微小RNA-520(miR-520)对肝硬化过程中肝星状细胞增殖的影响及其作用机制。方法:采用CCl_4法建立大鼠肝硬化模型,实时荧光定量PCR法检测肝脏组织中miR-520及骨形态发生蛋白(BMP)和其激活素膜结合抑制剂(BAMBI)的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测miR-520模拟物及抑制剂对肝星状细胞HSC-T6增殖的影响,双荧光素酶报告基因法检测miR-520与BAMBI的靶向关系,蛋白质印迹法检测miR-520抑制剂转染后BAMBI、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)、转化生长因子β1(TGF-β1)、哺乳动物类似基因(Smad)3和Smad7的表达。结果:在大鼠肝硬化模型中,miR-520表达显著上升,BAMBI表达显著下降。MiR-520抑制剂可显著抑制HSC-T6细胞的增殖,miR-520模拟物作用则反之。而且miR-520模拟物转染可显著降低荧光素酶报告基因的荧光强度(P<0.05)。蛋白质印迹结果表明,miR-520抑制剂可显著增加BAMBI和Smad7的表达,降低α-SMA、COL-1、TGF-β1、Smad3的表达。结论:miR-520抑制剂通过靶向上调BAMBI的表达,抑制TGF-β/Smad信号通路,进而抑制HSC-T6细胞的增殖,并且可能对肝硬化起到缓解作用。
出处
《现代医学》
2016年第11期1615-1620,共6页
Modern Medical Journal
