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桑叶f3h基因PCR克隆与分析

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摘要 目的克隆桑叶f3h基因并进行测序分析。方法选定了该基因的PCR扩增的上游引物为GTCCGAGACGAAGACGAG,下游引物为CTTGTACATCTCGGTGTA,PCR反应体系为95℃预变性2min→变性95℃15sec、退火58℃5sec、延伸72℃15sec(30个循环)→延伸72℃2min→4℃结束。并对克隆得到的片段进行分析。结果克隆出长度为515bP的片段,通过NCBI网站的ORF Finder找到开放式阅读框为345bp,翻译成氨基酸序列为115个氨基酸,理论分子质量为13202.2,等电点为5.43。结果证明本实验所扩增的基因片段为f3h。结论为进一步克隆f3h全长基因及下一步研究该基因的表达调控打下基础。
出处 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期756-757,共2页 Lishizhen Medicine and Materia Medica Research
基金 四川省教育厅项目(No.15ZB0099) 成都中医药大学校基金(No.ZRYY1413)
关键词 桑叶 f3h PCR
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