摘要
目的探讨雌激素受体β(ERβ)干扰质粒对前列腺癌PC3细胞生物学行为的影响,以及ERK1/2信号通路在其中的作用。方法针对ERβ特定靶定位置,构建干扰质粒psilencer-2.1-U6-neo-sh ERβ(sh ERβ),利用Lipofectemine2000作为载体将sh ERβ转染PC3细胞,采用G418筛选稳定低表达ERβ的PC3细胞。Real-time PCR及Western blot检测ERβ的表达。实验分为空白对照组、阴性对照组、sh ERβ组,将3组细胞注射在裸鼠皮下建立移植瘤模型,空白对照组未加入任何处理因素;阴性对照组转染空质粒psilencer-2.1-U6-neo;sh ERβ组转染重组质粒psilencer-2.1-U6-neo-sh ERβ。绘制肿瘤生长曲线和称取瘤重;应用免疫组织化学检测肿瘤组织ERβ的表达及ERK1/2活化;应用Western blot检测肿瘤组织VEGF的表达。结果测序比对分析表明成功完成了干扰质粒psilencer-2.1-U6-neo-sh ERβ的构建,Real-time PCR及Western blot结果显示成功转染并筛选出稳定低表达ERβ的PC3细胞。体内成功建立PC3细胞裸鼠移植瘤模型,移植瘤生长曲线显示sh ERβ组移植瘤生长速度明显快于其他两组。免疫组化结果显示ERβ阳性表达sh ERβ组最低;ERK1/2阳性表达在3组之间无明显差异,p-ERK1/2阳性表达sh ERβ组最高(P<0.05)。Western blot结果显示sh ERβ组VEGF蛋白表达明显高于其他两组(P<0.05)。结论 ERβ可通过抑制ERK1/2信号通路活化来抑制前列腺癌PC3细胞恶性生物学行为。
出处
《广东医学》
CAS
北大核心
2017年第18期2768-2772,共5页
Guangdong Medical Journal
