摘要
为建立一种检测传染性肌肉坏死病毒的荧光定量RT-PCR方法,利用GenBank中收录的该病毒的全基因序列,设计特异性的引物与TaqMan探针,并构建包含目的序列的质粒作为标准品,经过优化反应参数建立检测传染性肌肉坏死病毒的荧光定量RT-PCR方法。结果显示,建立的方法特异性良好,对其他8种病毒核酸无扩增,扩增总时长90 min。该方法的灵敏度达到220 copies/μL。重复性好,批内变异系数为0.3%～0.7%。外标法定量所需的标准曲线方程为y=﹣3.404x+37.21,相关系数R^2=0.997,扩增效率为96.7%。应用建立的方法对15批南美白对虾样品进行检测,未检出阳性。试验结果表明,所建立的实时荧光定量RT-PCR方法特异、灵敏、可定量,适用于对虾样品中传染性肌肉坏死病毒的检测。
出处
《畜牧兽医科学（电子版）》
2019年第4期8-12,共5页
Graziery Veterinary Sciences：Electronic Version
基金
成都海关科技项目(SK201702)
