摘要
目的探寻独活寄生汤含药血清对小鼠软骨细胞内锌离子及其转运蛋白ZIP8(Znic/ZIP8)的影响。方法将软骨细胞随机分为:空白对照组(Control)、模型对照组(Model/ZnCl2)、Ad-Zip8组(Ad-Zip8)、Zip8-siRNA组(Zip8-siRNA)。分组后,培养体系内加入1ng/mL IL-1β,培养24 h后,除空白对照组,其余各组加入100μmol/LZnCl2,同时给予不同剂量(体积分数10%、5%、2.5%)独活寄生汤含药血清;继续培养48 h后采用荧光染色技术检测软骨细胞内Zn2+浓度,提取细胞总RNA,去除gDNA,合成cDNA,采用qRT-PCR检测软骨细胞ZIP8基因的表达,采用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)结合图像分析ZIP8蛋白表达。结果独活寄生汤含药血清可以降低由IL-1β诱导的炎症状态下软骨细胞内Zn2+的浓度,并呈量-效关系;独活寄生汤含药血清对可降低Zip8mRNA/ZIP8蛋白的表达水平,但其作用强度不及Zip8-siRNA,但其无法抑制由Ad-Zip8引发的Zip8m RNA/ZIP8蛋白表达水平升高。结论独活寄生汤含药血清可通过降低炎性状态的软骨细胞内Zn^2+浓度,下调ZIP8的转录和蛋白水平,以维持关节软骨细胞Zn^2+的稳态。
出处
《时珍国医国药》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第5期1057-1060,共4页
Lishizhen Medicine and Materia Medica Research
基金
国家自然科学基金(81574007)。
