摘要
目的基于TLR4/NF-κB信号通路探讨葛根黄连黄芩汤改善葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导溃疡性结肠炎小鼠炎症反应的作用机制。方法20只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为空白组、中药组、模型组、模型+中药组。模型组和模型+中药组采用2.5%DSS溶液连续饮用7 d,再换纯水饮用4 d构建急性溃疡性结肠炎小鼠模型。中药组及模型+中药组小鼠按体质量2 g/(kg·d)给予葛根黄连黄芩汤连续灌胃11 d,空白组及模型组小鼠给予等体积的生理盐水灌胃。每天记录小鼠体质量变化,同时采用疾病活动指数(DAI)评分法观察4组小鼠体质量、粪便黏稠度、粪便潜血的变化;观察4组小鼠结肠组织整体性状,测量结肠长度;HE染色法观察4组小鼠结肠组织病理变化;Western blot检测4组小鼠结肠组织中TLR4、p-P65/P65的蛋白表达量;免疫组化(IHC)法检测4组小鼠结肠组织中p-P65蛋白定位及阳性表达;qPCR法检测4组小鼠结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平;采用眼球取血法将血液离心收集血清,酶联免疫(ELISA)法检测4组小鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α含量。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量下降,DAI评分显著升高(P<0.05);结肠长度缩短(P<0.05);结肠黏膜糜烂充血严重,炎症细胞浸润明显,TLR4、p-P65/P65的蛋白表达量显著升高(P<0.05);结肠中p-P65的阳性表达率显著增加,且入核数量增加(P<0.05);结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平显著升高(P<0.05);血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高(P<0.05)。与模型组比较,模型+中药组小鼠体质量下降幅度有所缓解,DAI评分低于模型组(P<0.05),结肠长度延长(P<0.05);结肠黏膜轻度糜烂,炎症细胞浸润减少;TLR4、p-P65/P65的蛋白表达量显著降低(P<0.05);结肠中p-P65的阳性表达率显著降低(P<0.05),且入核数量减少;IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平显著降低(P<0.05);血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著降低(P<0.05)。结论葛根黄连黄芩汤可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路的激活,减轻炎症反应,从而起到治疗溃疡性结肠炎的作用。
出处
《福建中医药》
2023年第9期27-33,共7页
Fujian Journal of Traditional Chinese Medicine
基金
陈可冀科研基金项目(CKJ2020006)
福建中医药大学校管课题(X2021005-重点)。
