摘要
目的:基于Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路探讨艾灸干预膝骨关节炎(KOA)模型兔的可能作用机制。方法:将24只新西兰兔随机分为正常组、模型组及艾灸组,每组8只。除正常组外,其余2组兔采用右膝关节腔内注射木瓜蛋白酶水溶液的方法制作KOA模型。造模成功后,艾灸组兔每日予艾条悬灸右膝犊鼻穴20 min,连续治疗21 d;正常组和模型组正常饲养,不给予任何干预措施。干预结束后次日,各组兔麻醉后心脏采血,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;取各组兔右膝关节股骨端软骨,采用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组兔膝关节软骨的组织形态,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法和实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法分别测定各组兔膝关节软骨组织中Wnt信号蛋白-3α(Wnt3α)、β-连环蛋白(β-catenin)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)蛋白及mRNA的表达水平,采用免疫组化法检测各组兔膝关节软骨组织中IL-1β、TNF-α的表达,并分析其积分光密度(IOD)。结果:模型组兔血清IL-1β、TNF-α明显高于正常组(P<0.05),艾灸组上述指标明显低于模型组(P<0.05)。与正常组比较,模型组兔膝关节软骨细胞明显变性,软骨组织损伤严重;艾灸组兔膝关节软骨结构较为完整,软骨细胞数目较多且分布较均匀,细胞形态较为正常。模型组兔膝关节软骨组织中Wnt3α、β-catenin、MMP-13蛋白和mRNA相对表达量均明显高于正常组(P<0.05),艾灸组兔膝关节软骨组织中上述指标蛋白和mRNA相对表达量均明显低于模型组(P<0.05)。模型组兔膝关节软骨组织IL-1β、TNF-α蛋白表达显著高于正常组(P<0.05),艾灸组兔膝关节软骨组织上述蛋白表达明显低于模型组(P<0.05)。结论:艾灸犊鼻穴可下调KOA模型兔血清及软骨组织中炎性因子的表达,有效缓解膝关节软骨组织损伤,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化有关。
作者
张宪基
汪宗保
王科文
李鑫
李德坤
单自亮
姚长风
ZHANG Xianji;WANG Zongbao;WANG Kewen;LI Xin;LI Dekun;SHAN Ziliang;YAO Changfeng
出处
《江苏中医药》
CAS
2023年第12期68-72,共5页
Jiangsu Journal of Traditional Chinese Medicine
基金
安徽省自然科学基金面上项目(1508085MH165)
安徽省卫生健康委科研项目(AHWJ2021b052)
安徽省高等学校省级质量工程项目(2020kfkc289)。
