摘要
目的通过优化嵌合抗原受体结构制备具有中央记忆T细胞表型并靶向双唾液酸神经节苷脂(GD2)的新型嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞,检测其对GD2阳性骨肉瘤细胞的杀伤能力。方法构建由抗GD2单链抗体、CD28铰链区及跨膜序列、4-1BB胞内共刺激域和CD3ζ胞内段组成的新型嵌合抗原受体慢病毒载体,包装纯化慢病毒并感染Jurkat细胞,检测所得新型CAR-T细胞的感染效率、扩增能力、记忆表型以及不同骨肉瘤细胞株的GD2表达水平;慢病毒感染并筛选稳定表达荧光素酶和增强型红色荧光蛋白(eRFP)的GD2+MG63细胞系;荧光素酶实验检测新型CAR-T细胞对建系MG63细胞的杀伤能力。结果获得优化结构的新型CAR-T细胞,CAR阳性率达到92%以上;新型CAR-T细胞具有良好的体外扩增能力和中央记忆T细胞表型;杀伤实验显示新型CAR-T细胞能够有效杀伤GD2阳性的MG63骨肉瘤细胞。结论通过优化CAR分子结构成功制备的新型CAR-T细胞具有中央记忆T细胞表型,能够有效杀伤GD2阳性骨肉瘤细胞。
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第10期872-877,共6页
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology
基金
国家自然科学基金(82073361)。
