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枸杞多糖对慢性低氧大鼠外周血单个核细胞中HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白表达的影响 被引量：2
1
作者 郝雪琦 关文霞 +2 位作者 丁彦琴 张健 李芳 《宁夏医科大学学报》 2019年第1期14-18,23,共6页
目的探讨慢性低氧对大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factors-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平及枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)... 目的探讨慢性低氧对大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factors-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平及枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)干预的影响。方法 28只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为常氧组、低氧组、低氧/枸杞多糖组。低氧组设置为常压低氧舱(氧浓度为10%),LBP干预组分别给予LBP[200mg·(kg·d)-1]和[300mg·(kg·d)-1]2个剂量灌胃。各组干预时间均为4周。干预结束后进行血常规检测,然后收集大鼠外周血并分离PBMCs,采用荧光定量PCR和Western blot分别检测大鼠外周血单个核细胞中HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白的表达。结果与常氧组相比,低氧组血红蛋白含量和红细胞比容升高(P均<0.01),与低氧组比较,低氧/枸杞多糖(200mg,300mg)组血红蛋白含量和红细胞比容均降低(P<0.05或<0.01);与常氧组相比,低氧组大鼠外周血单个核细胞中HIF-1α、VEGF在mRNA及蛋白表达水平均升高(P均<0.01);与低氧组相比,低氧/枸杞多糖干预的两个剂量组HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白表达水平均下降(P<0.05或<0.01);LBP(300mg)组HIF-1α、VEGF mRNA表达低于LBP(200mg)组(P<0.05)。结论慢性低氧引起大鼠PBMCs中HIF-1α和VEGF基因表达水平上调,LBP干预能够在一定程度下调HIF-1α和VEGF基因表达。 展开更多
关键词 低氧 单个核细胞 缺氧诱导因子1Α 血管内皮生长因子 枸杞多糖 大鼠
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犬博卡病毒结构蛋白VP1多克隆抗体的制备及特异性鉴定 被引量：1
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作者 穆乐 孙锦涵 +3 位作者 张健 张淋然 丁彦琴 孙玉宁 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2021年第6期55-61,共7页
为深入研究犬博卡病毒(MVC)结构蛋白VP1及其抗体在MVC感染及致病分子机制中的作用,本研究以先期构建的MVC感染性克隆载体pI-MVC为模板,构建VP1结构蛋白(独特区)原核表达载体pET32a(+)-VP1N,转化于大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导... 为深入研究犬博卡病毒(MVC)结构蛋白VP1及其抗体在MVC感染及致病分子机制中的作用,本研究以先期构建的MVC感染性克隆载体pI-MVC为模板,构建VP1结构蛋白(独特区)原核表达载体pET32a(+)-VP1N,转化于大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达后进行蛋白可溶性分析;用镍柱亲和层析法纯化诱导表达产物,以纯化的VP1N融合蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔,获得特异性抗VP1N多克隆抗体;通过ELISA的方法测定VP1N多克隆抗体效价,并采用Western blot和免疫荧光鉴定VP1N抗体的特异性。结果表明:重组蛋白VP1N可高效可溶性表达,分子量约为34 kDa;VP1N融合蛋白免疫兔后,ELISA法测定VP1N多抗效价达1∶1600 000;Western blot结果显示,VP1N多克隆抗体能够与MVC感染靶细胞后的天然VP1蛋白反应;细胞免疫荧光结果显示,该抗体也可与MVC感染WRD细胞中的天然VP1蛋白反应,且发现VP1大量分布于WRD细胞的胞核中。本研究所制备的VP1N抗体具有很好的反应性和特异性,为进一步深入研究VP1蛋白在博卡病毒致病性及感染机制中的研究提供实验基础。 展开更多
关键词 犬博卡病毒 VP1结构蛋白 多克隆抗体 特异性
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不同磷源在红霉素工程菌发酵过程中的作用研究
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作者 丁彦琴 伍涵宇 +1 位作者 牛春 张萍 《湖北畜牧兽医》 2020年第12期5-8,共4页
通过向红霉素种子液和发酵培养基中添加磷酸二氢钾和磷酸氢二钾,探讨2种磷源对红霉素培养发酵过程中的pH、菌体浓度及效价的影响,以及进一步优化得到最佳的培养基组分配比。结果表明,与原始工艺相比,向红霉素发酵液中增添适量的磷酸氢... 通过向红霉素种子液和发酵培养基中添加磷酸二氢钾和磷酸氢二钾,探讨2种磷源对红霉素培养发酵过程中的pH、菌体浓度及效价的影响,以及进一步优化得到最佳的培养基组分配比。结果表明,与原始工艺相比,向红霉素发酵液中增添适量的磷酸氢二钾作为无机磷源能增加红霉素的产量,使发酵摇瓶中红霉素效价提高了20%,达到7560 U/mL;采用正交法对发酵液培养基中的淀粉、糊精、磷酸氢二钾和黄豆饼粉进行了相应的优化,效价升高至7910 U/mL,较未优化提高4.6%,较未加入磷酸氢二钾发酵液提高了25.7%。 展开更多
关键词 红色糖多孢菌 红霉素 发酵培养基 磷酸氢二钾 磷酸二氢钾
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微生物生产N-乙酰氨基葡萄糖的进展、应用及展望 被引量：2
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作者 伍涵宇 丁彦琴 +2 位作者 牛春 石彦鹏 张萍 《轻工科技》 2021年第2期4-8,共5页
氨基葡萄糖(GlcN)是一种氨基糖,它是由葡萄糖分子的羟基被氨基所取代后的化合物。GlcN及其乙酰化衍产物N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)已广泛用于食品、化妆品、保健品和制药行业,传统方法通过从蟹壳和虾壳中提取的几丁质(GlcNAc的线性聚合物... 氨基葡萄糖(GlcN)是一种氨基糖,它是由葡萄糖分子的羟基被氨基所取代后的化合物。GlcN及其乙酰化衍产物N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)已广泛用于食品、化妆品、保健品和制药行业,传统方法通过从蟹壳和虾壳中提取的几丁质(GlcNAc的线性聚合物)进行酸水解制成,但是原料来源受限、易造成环境污染和过敏反应。近些年开始来利用重组大肠杆菌进行微生物发酵,替代传统方法生产GlcNAc,因其是一种环境对友好的工艺而受到广泛关注,目前已取得相当大的进展。本文综述产GlcNAc微生物代谢途径的改造及其生产应用,重点介绍利用重组微生物改善GlcNAc产量的代谢和工艺工程策略。 展开更多
关键词 N-乙酰氨基葡萄糖 基因工程菌 代谢工程 骨关节治疗
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