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几种因素在L-天冬酰胺酶化学修饰中对酶活力及抗原性的影响 被引量:10
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作者 曹淑桂 田洁 +3 位作者 赵秋宇 丁忠田 王树歧 程玉华 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第10期732-738,共7页
为了寻求在较好地保持酶活力的同时解除L-天冬酰胺酶抗原性的方法,采用不同分子量的乙酸酐、右旋糖酐和单甲氧基聚乙二醇,作为修饰剂和不同的修饰方法对该酶进行了化学修饰。结果表明在保持酶活性和降低抗原性方面,大分子修饰剂右旋糖... 为了寻求在较好地保持酶活力的同时解除L-天冬酰胺酶抗原性的方法,采用不同分子量的乙酸酐、右旋糖酐和单甲氧基聚乙二醇,作为修饰剂和不同的修饰方法对该酶进行了化学修饰。结果表明在保持酶活性和降低抗原性方面,大分子修饰剂右旋糖酐、单甲氧基聚乙二醇优于小分子乙酸酐,底物保护修饰优于直接修饰;活化PEG,优于活化PEG_1。在底物保护下的PEG,修饰酶其抗原性完全解除的同时,酶活力保持在30%以上。 展开更多
关键词 化学修饰 抗原性 L-天冬酰胺酶
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脂肪酶在有机溶剂中催化酯合成和酯交换反应 被引量:6
2
作者 曹淑桂 刘占斌 +2 位作者 冯雁 丁忠田 程玉华 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1991年第11期1555-1557,共3页
报道了猪胰脂肪酶在冻干时的pH值、有机溶剂的极性、反应系统的含水量、温度以及底物碳链的长度和支链对酶在有机相中催化活性的影响规律。利用该酶合成了具有玫瑰香味的月桂酸香茅酯和辛酸香茅酯。
关键词 脂肪酶 合成 交换 香料
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化学修饰解除天冬酰胺酶抗原性研究 被引量:7
3
作者 程玉华 曹淑桂 +2 位作者 赵秋宇 王树歧 丁忠田 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1989年第1期28-32,共5页
本文报道了用活化的单甲氧基聚乙二醇PEG_2在底物保护的条件下修饰天冬酰胺酶。结果,修饰酶在抗原抗体结合能力完全消失的同时,酶活力保持30%以上,且修饰酶的抗胰蛋白酶水解能力明显增强,体外半衰期延长17倍,免疫原性显著下降。
关键词 在冬酰胺酶 抗原性 化学修饰
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化学修饰的和固定化的脂肪酶在有机溶剂中的催化作用研究 被引量:7
4
作者 曹淑桂 冯雁 +3 位作者 刘占斌 丁忠田 马林 程玉华 《生物化学杂志》 CSCD 1991年第6期646-650,共5页
本文对聚乙二醇修饰脂肪酶、多孔玻璃载体吸附酶、多孔玻璃载体丙酮沉积酶、硅藻土吸附酶、氧化铝吸附酶和琼脂珠疏水载体吸附酶在有机相中酯合成和酯交换反应的催化作用进行了研究。实验表明,不同形式的酶需要不同的最适加水量。而且,... 本文对聚乙二醇修饰脂肪酶、多孔玻璃载体吸附酶、多孔玻璃载体丙酮沉积酶、硅藻土吸附酶、氧化铝吸附酶和琼脂珠疏水载体吸附酶在有机相中酯合成和酯交换反应的催化作用进行了研究。实验表明,不同形式的酶需要不同的最适加水量。而且,在各自最适条件下,对各种形式酶进行了比较,得出硅藻土和琼脂珠疏水载体是很好的固定化载体,疏水性琼脂珠固定化酶在有机相中的活力比酶粉高46.5%。 展开更多
关键词 脂肪酶 化学修饰 固定化 有机溶剂
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天冬氨酸酶在盐酸胍变性时的酶活性与构象变化 被引量:4
5
作者 曹淑桂 會晨波 +1 位作者 丁忠田 程玉华 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1990年第5期432-436,共5页
本文应用荧光光谱法和CD光谱法测定了天冬氨酸酶在不同浓度盐酸胍中变性时的构象与活力变化,并测定了天冬氨酸酶在不同浓度盐酸胍中变性时的巯基暴露速度。发现一部分色氨酸残基位于分子疏水核内部,另一部分位于分子表面;至少一部分酪... 本文应用荧光光谱法和CD光谱法测定了天冬氨酸酶在不同浓度盐酸胍中变性时的构象与活力变化,并测定了天冬氨酸酶在不同浓度盐酸胍中变性时的巯基暴露速度。发现一部分色氨酸残基位于分子疏水核内部,另一部分位于分子表面;至少一部分酪氨酸残基与其相邻近基团形成氢键。该酶的大部分巯基位于分子内部结构比较稳定的区域而不在分子表面。低浓度盐酸胍作用下,构象发生明显变化,而活力维持原水平;盐酸胍达到一定浓度后,活力才发生骤然下降。CD谱表明,α-螺旋构象维持整个分子构象,因而对于维持活性中心构象是重要的。 展开更多
关键词 天冬氨酸酶 变性 构象
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猪肝DFPase的结构及某些性质的研究 被引量:1
6
作者 张应玖 曹淑桂 +2 位作者 丁忠田 马林 程玉华 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1990年第6期522-526,共5页
本文对纯化了的猪肝DFPase~[**]进行了一系列结构和性质的测定。用重复中毒的方法证明了猪肝中低分子量二异丙基氟磷酸酯(DFP)水解酶(DFPase)是属于催化酶。分析了DFPase的氨基酸组成并求出其分子量为17900。该酶的km值为6.7×10^(-... 本文对纯化了的猪肝DFPase~[**]进行了一系列结构和性质的测定。用重复中毒的方法证明了猪肝中低分子量二异丙基氟磷酸酯(DFP)水解酶(DFPase)是属于催化酶。分析了DFPase的氨基酸组成并求出其分子量为17900。该酶的km值为6.7×10^(-4)mol/L。催化水解DFP的最适pH为7.5~7.7,反应最佳温度为70℃。根据催化水解DFP、Soman的活力以及Mn^(2+)对此酶的影响证明该酶属于Mazur type DFPase~[1]。 展开更多
关键词 DFPase A-酯酶 B-酯酶 结构
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盐酸胍诱导的α淀粉酶去折叠与再折叠 被引量:1
7
作者 张学忠 吴晓霞 +1 位作者 汪大伟 丁忠田 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1993年第6期648-652,共5页
利用蛋白质内源荧光和酶活性两种信号以及荧光偏振,HPLC和停流等方法研究了盐酸胍诱导的α淀粉酶去折叠与重折叠的平衡转变和动力学。实验结果表明α淀粉酶去折叠与重折叠是两个不同的过程;变性与复性过程中可能伴有聚集体生成;去折叠... 利用蛋白质内源荧光和酶活性两种信号以及荧光偏振,HPLC和停流等方法研究了盐酸胍诱导的α淀粉酶去折叠与重折叠的平衡转变和动力学。实验结果表明α淀粉酶去折叠与重折叠是两个不同的过程;变性与复性过程中可能伴有聚集体生成;去折叠与重折叠均为双相过程,重折叠大约始于2秒之后。 展开更多
关键词 淀粉酶 Α淀粉酶 盐酸胍 折叠
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化学修饰法解除羊生长激素(OGH)抗原性的研究
8
作者 曹淑桂 赵秋宇 +3 位作者 丁忠田 程玉华 聂磊 麦荫乔 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1991年第3期119-121,共3页
生长激素具有刺激骨及软骨的生长,影响蛋白质、糖类、脂类的代谢,调节各种形式的RNA的生物合成等一些重要的生理功能。因而各种来源的生长激素的研究一直是一个非常活跃的领域。自从1972年Bewley等人查明了羊生长激素(OGH)的一级结构以... 生长激素具有刺激骨及软骨的生长,影响蛋白质、糖类、脂类的代谢,调节各种形式的RNA的生物合成等一些重要的生理功能。因而各种来源的生长激素的研究一直是一个非常活跃的领域。自从1972年Bewley等人查明了羊生长激素(OGH)的一级结构以来,人们为探讨其结构与功能的关系,用小分子修饰羊生长激素,取得了一定的结果。然而羊生长激素用于临床却受到异体蛋白抗原性的限制。为了解决这一问题。 展开更多
关键词 生长激素 化学修饰法 抗原性
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内切葡聚糖酶的纯化及其基本性质
9
作者 冯雁 靳小红 +3 位作者 丁忠田 曹淑桂 程玉华 刘忠英 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1991年第3期116-118,共3页
纤维素酶是自然界碳素循环中的一种关键酶,它可以将纤维素性材料,转化为可直接利用的葡萄糖,并可通过其它酶和酶系统的作用转化为乙醇及蛋白质。纤维素酶是多酶体系,包含外切葡聚糖酶、内切葡聚糖酶(Cx)及β-葡萄糖苷酶。其中内切葡聚... 纤维素酶是自然界碳素循环中的一种关键酶,它可以将纤维素性材料,转化为可直接利用的葡萄糖,并可通过其它酶和酶系统的作用转化为乙醇及蛋白质。纤维素酶是多酶体系,包含外切葡聚糖酶、内切葡聚糖酶(Cx)及β-葡萄糖苷酶。其中内切葡聚糖酶含有若干种同工酶,能将可溶性纤维素转化为还原寡糖,是纤维素酶系中的重要组分,为了深入研究Cx酶的性质,本文对其中一种Cx酶进行了分离纯化,并对其基本性质进行了研究。 展开更多
关键词 内切葡聚糖酶 提纯 纤维素酶
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高峰淀粉酶的分子可及性的研究
10
作者 汪大伟 林大威 +2 位作者 张学忠 吴晓霞 丁忠田 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期134-138,共5页
依据高峰淀粉酶的晶体结构数据对它的分子可及性进行了计算和分析,得到了极性与非极性氨基酸的分布、极性原子与非极性原子对可及性的贡献、催化活性中心裂隙的构象、C末端结构域空间拓扑等信息。活性部位氨基酸残基的可及性研究结果... 依据高峰淀粉酶的晶体结构数据对它的分子可及性进行了计算和分析,得到了极性与非极性氨基酸的分布、极性原子与非极性原子对可及性的贡献、催化活性中心裂隙的构象、C末端结构域空间拓扑等信息。活性部位氨基酸残基的可及性研究结果与酶-底物复合物模型相符。 展开更多
关键词 分子可及性 高峰淀粉酶 淀粉酶
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溶液中d(AT)_6的构象转化
11
作者 张今 张红缨 +1 位作者 滕利荣 丁忠田 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1990年第2期107-110,共4页
本文报道了溶液中d(AT)_6构象研究的结果。探讨了d(AT)_6的物化特征。d(AT)_6在0.05mol/L NaCl和4.5 mol/L NaCl中的UV和CD谱是典型的Z-和B-型DNA谱,UV熔化曲线形状依赖于盐的浓度。当盐浓度低于0.05 mol/L NaCl时,曲线有负斜率;而盐浓... 本文报道了溶液中d(AT)_6构象研究的结果。探讨了d(AT)_6的物化特征。d(AT)_6在0.05mol/L NaCl和4.5 mol/L NaCl中的UV和CD谱是典型的Z-和B-型DNA谱,UV熔化曲线形状依赖于盐的浓度。当盐浓度低于0.05 mol/L NaCl时,曲线有负斜率;而盐浓度大于0.05mol/L NaCl时,曲线的斜率变为正,即随盐浓度增加,T_m值增加。在链浓度的依赖性基础上,计算了两种构象的△H和△S。 展开更多
关键词 d(AT)6 构象转化 核苷酸
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IBM PC微机上的蛋白质数据库及其管理系统
12
作者 汪大伟 丁忠田 张学忠 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1992年第1期115-118,共4页
在IBM PC微机上建立了一个蛋白质数据库及其管理分析系统。
关键词 蛋白 数据库 微机 管理系统 PDB
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Tween 80解除乙醇对内切葡聚糖酶(Cx)的抑制作用
13
作者 冯雁 曹淑桂 +1 位作者 丁忠田 程玉华 《生物化学杂志》 CSCD 1991年第6期697-701,共5页
通过还原糖量的测定,可知Cx酶在乙醇存在下活力降低。当该体系中加入一定浓度的Tween 80时,Cx酶抗乙醇抑制的能力增强。由紫外光谱及圆二色谱可见,乙醇使Cx酶中α-螺旋含量增加,Tween 80使Cx酶中α-螺旋含量减少,结构变得松散。适量的Tw... 通过还原糖量的测定,可知Cx酶在乙醇存在下活力降低。当该体系中加入一定浓度的Tween 80时,Cx酶抗乙醇抑制的能力增强。由紫外光谱及圆二色谱可见,乙醇使Cx酶中α-螺旋含量增加,Tween 80使Cx酶中α-螺旋含量减少,结构变得松散。适量的Tween 80能使Cx酶在乙醇中保持一种具有较高活力的构象。 展开更多
关键词 内切葡萄糖酶 乙醇 Tween80
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非水介质中辣根过氧化物酶(HRP)荧光活性测定法 被引量:2
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作者 孙旭东 马林 +7 位作者 刘伟 黄仲立 董爱武 丁忠田 唐玉秋 孙天霄 由德林 程玉华 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1994年第4期490-495,共6页
建立了一种分析HRP催化活力的新方法。该方法基于单体(底物)、聚合物(产物)的荧光发射光谱不重叠,使用荧光光谱仪,通过测量底物荧光淬灭来检测HRP在非水介质中(二氧六环-水、乙醇-水、丙酮-水体系)催化酚类、芳香胺类... 建立了一种分析HRP催化活力的新方法。该方法基于单体(底物)、聚合物(产物)的荧光发射光谱不重叠,使用荧光光谱仪,通过测量底物荧光淬灭来检测HRP在非水介质中(二氧六环-水、乙醇-水、丙酮-水体系)催化酚类、芳香胺类物质聚合的活力。此方法迅速、简便,结果是定量并可重复的,并能定量地计算底物转化率。 展开更多
关键词 辣根 过氧化物酶 非水相 荧光 活度
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天冬氨酸酶的分离提纯及其变性复性的研究 被引量:1
15
作者 曾晨波 丁忠田 +2 位作者 曹淑桂 马林 程玉华 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 1990年第3期105-109,共5页
以E.Coli J-3为原料,经菌体破碎、链霉素处理、热处理、硫铵分级、磷酸钙胶处理、DEAESephadex A-50柱层析、羟基磷灰石柱层析、Ultrogel AcA 34凝胶过滤、HPLC层析九个步骤,得到聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳纯的天冬氨酸酶。并探讨了各种环... 以E.Coli J-3为原料,经菌体破碎、链霉素处理、热处理、硫铵分级、磷酸钙胶处理、DEAESephadex A-50柱层析、羟基磷灰石柱层析、Ultrogel AcA 34凝胶过滤、HPLC层析九个步骤,得到聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳纯的天冬氨酸酶。并探讨了各种环境因素对变性复性程度的影响。结果表明,不同的变性、复性条件会诱导不同构象的产生。诱导酶的性质与天然酶不同。 展开更多
关键词 天冬氨酸酶 提纯 变性 复性
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环境试样中微量氰化物的气相色谱测定 被引量:4
16
作者 郭雅先 丁忠田 曹祥发 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS 1985年第11期983-985,共3页
近几年来,用气相色谱法测定氰化物的研究颇多,其中以甲基化法较为简便。本文采用通气法浓缩,在吸收管内以甲基化的方式,收集少量气体为试样,用氢焰离子化检测器进行氰化物的气相色谱测定,得到了良好的结果。将此法用于水和大气等环境试... 近几年来,用气相色谱法测定氰化物的研究颇多,其中以甲基化法较为简便。本文采用通气法浓缩,在吸收管内以甲基化的方式,收集少量气体为试样,用氢焰离子化检测器进行氰化物的气相色谱测定,得到了良好的结果。将此法用于水和大气等环境试样分析,检出界限可达ppb级,准确度和精密度也都令人满意。 展开更多
关键词 甲基化法 通气法 气相色谱测定 氢焰离子化检测器 氰化物 环境试样 气相色谱法测定 准确度和精密度
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