草鱼出血病鱼主要器官组织的超薄切片观察及感染力的比较 被引量：14

1

作者 丁清泉 余兰芬 +2 位作者 王学兰 柯丽华 叶荫云 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第1期66-69,共4页

草鱼出血病是一种严重的病毒性疾病,它会引起草鱼大批死亡。已有报告指出,在病鱼肾组织的超薄切片中观察到病毒粒子的存在,并认为肾脏是草鱼出血病病毒侵袭是严重的器官。在制备草鱼出血病组织疫苗时仅取病鱼的肝、脾、肾和肌肉组织,肠... 草鱼出血病是一种严重的病毒性疾病,它会引起草鱼大批死亡。已有报告指出,在病鱼肾组织的超薄切片中观察到病毒粒子的存在,并认为肾脏是草鱼出血病病毒侵袭是严重的器官。在制备草鱼出血病组织疫苗时仅取病鱼的肝、脾、肾和肌肉组织,肠道组织往往弃之不用。 展开更多

关键词 草鱼出血病 鱼呼肠孤病毒 超薄切片

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草鱼出血病病毒对其它鱼的感染性研究 被引量：9

2

作者 丁清泉 余兰芬 +1 位作者 柯丽华 蔡宜权 《中国病毒学》 CSCD 1991年第4期371-373,共3页

用草鱼出血病病鱼分离出的草鱼出血病病毒(Grass carp hemorrhage virus,GCHV)感染其它常见鱼并用ELISA方法检查感染鱼组织提取液,结果表明:青鱼、鲢鱼、布氏鳌条对GCHV抗体呈阳性反应;鲤鱼、鳙鱼、鲫鱼、团头鲂、泥鳅则呈阴性反应。综... 用草鱼出血病病鱼分离出的草鱼出血病病毒(Grass carp hemorrhage virus,GCHV)感染其它常见鱼并用ELISA方法检查感染鱼组织提取液,结果表明:青鱼、鲢鱼、布氏鳌条对GCHV抗体呈阳性反应;鲤鱼、鳙鱼、鲫鱼、团头鲂、泥鳅则呈阴性反应。综合感染鱼发病症状及死亡特征,初步认为:青鱼对GCHV是易感的,GCHV能在鲢鱼、布氏蟹条体内增值,但毒力较低,鳙鱼、鲫鱼、团头鲂、鲤鱼、泥鳅能抗GCHV感染。 展开更多

关键词 草鱼出血病 草鱼出血病病毒 ELISA检测 感染性

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σ^(38)和RMF对有关基因表达调控的研究 被引量：1

3

作者 丁清泉 石浜明 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期344-350,共7页

将大肠杆菌的rpoS和rmf基因突变型和野生型菌株分别培养在营养丰富的LB培养基和成分有限的EP培养基上。在相同条件下,进入稳定期后的突变型菌株的活细胞数低于野生菌株。采用 Western blot方法测定了不同基因产物在稳定期的变化。σ^(38... 将大肠杆菌的rpoS和rmf基因突变型和野生型菌株分别培养在营养丰富的LB培养基和成分有限的EP培养基上。在相同条件下,进入稳定期后的突变型菌株的活细胞数低于野生菌株。采用 Western blot方法测定了不同基因产物在稳定期的变化。σ^(38)对RNA聚合酶核心酶亚单位结构基因 rpoA、rpoB、rpoC以及groEs和tufA基因的表达影响不大,能抑制crp和促进rmf的表达。RMF在营养丰富的条件下对rpoA、rpoD,groEl、rho、tufA和ompA基因的表达有促进作用,而在EP条件下的影响并不明显,对crp和rpoS的表达分别有抑制和促进作用。 展开更多

关键词 基因表达 转录调控 σ^38因子 核糖体调节因子

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RNA病毒RNA聚合酶的研究进展 被引量：2

4

作者 丁清泉 《中国病毒学》 CSCD 1998年第2期107-113,共7页

自然界仅有ＲＮＡ病毒以ＲＮＡ作为基因载体。依赖于ＲＮＡ的ＲＮＡ聚合酶在这种病毒的增殖复制期起到了非常重要的作用。它一方面以病毒ＲＮＡ为模板复制子代病毒的基因，另一方面也将病毒增殖期间需要的蛋白质和酶类的基因转录成为ｍ... 自然界仅有ＲＮＡ病毒以ＲＮＡ作为基因载体。依赖于ＲＮＡ的ＲＮＡ聚合酶在这种病毒的增殖复制期起到了非常重要的作用。它一方面以病毒ＲＮＡ为模板复制子代病毒的基因，另一方面也将病毒增殖期间需要的蛋白质和酶类的基因转录成为ｍＲＮＡ，也就是说它担负了复制酶和转... 展开更多

关键词 RNA聚合酶 RNA病毒 转录 复制

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PVDF球形多孔材料的抑爆性能研究 被引量：1

5

作者 丁清泉 袁必和 +3 位作者 陈先锋 黄楚原 贺云龙 张玉铎 《中国安全科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期177-182,共6页

为分析聚偏氟乙烯(PVDF)球形多孔材料对管道内甲烷-空气预混气体的抑爆性能,自主搭建气体爆炸测试平台,试验研究球形多孔材料填充密度及填充方式等因素对甲烷-空气预混气体爆炸的影响机制。结果表明:与空爆相比,填充多孔材料后,管道内... 为分析聚偏氟乙烯(PVDF)球形多孔材料对管道内甲烷-空气预混气体的抑爆性能,自主搭建气体爆炸测试平台,试验研究球形多孔材料填充密度及填充方式等因素对甲烷-空气预混气体爆炸的影响机制。结果表明:与空爆相比,填充多孔材料后,管道内爆炸超压及最大爆炸超压上升速率均明显降低;对甲烷-空气的抑制效果与材料的填充密度呈正相关,当填充密度为0.077 g/cm^(3)时,球形多孔材料对爆炸超压的抑制率达到54.7%,最大爆炸超压上升速率降低了58.3%;改变材料的填充方式显著影响管道内的气体爆炸超压,采用分散填充的方式增强了多孔材料对最大爆炸超压的抑制作用,在填充密度(为0.0385 g/cm^(3)时)不变的情况下,对管道末端气体最大爆炸超压的抑制率达到66%。说明改变材料填充密度和填充方式均会影响多孔材料对甲烷-空气预混气体爆炸的抑制效果。 展开更多

关键词 聚偏氟乙烯(PVDF) 球形多孔材料 抑爆性能 爆炸超压 填充密度 填充方式

原文传递

有机盐对基因启动子的σ因子选择性的影响 被引量：1

6

作者 丁清泉 石浜明 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第5期613-617,共5页

用σ￣（７０）或σ￣（３８）和核心酶（Ｅ）组成的大肠杆菌ＲＮＡ聚合酶全酶（Ｅσ）对四种启动子进行了体外转录。结果表明：ｌａｃＵＶ５，ｒｐｌＪ主要被Ｅσ￣（７０）识别，ｋａｔＥ主要被Ｅσ￣（３８）识别，ｆｉｃ在低盐浓度... 用σ￣（７０）或σ￣（３８）和核心酶（Ｅ）组成的大肠杆菌ＲＮＡ聚合酶全酶（Ｅσ）对四种启动子进行了体外转录。结果表明：ｌａｃＵＶ５，ｒｐｌＪ主要被Ｅσ￣（７０）识别，ｋａｔＥ主要被Ｅσ￣（３８）识别，ｆｉｃ在低盐浓度时被Ｅσ￣（７０）识别，在高浓度盐时被Ｅσ￣（３８）识别；Ｅσ￣（３８）转录特异性启动子所需酶量大于Ｅσ￣（７０）转录特异性启动子的酶量；在含有分别对σ￣（７０）或σ￣（３８）亲和性大的混和启动子的体外转录中，启动子之间不存在干扰和竞争，转录水平与启动子浓度成正相关。 展开更多

关键词 生化遗传学 Σ因子 基因启动子 有机盐

原文传递

σ^(38)识别的启动子-35区核酸序列特征研究

7

作者 丁清泉 戴顺英 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第1期32-35,共4页

依据部分资料假定大肠杆菌ＲＮＡ聚合酶的σ３８亚单位在特异启动子的－３５区识别的保守序列是－ＴＣＴＣＣＣ－，合成用其它碱基分别取代这一区域每一个碱基的引物，以ｏｓｍＹ基因片段为模板，通过ＰＣＲ扩增成－３５区含不同碱基序... 依据部分资料假定大肠杆菌ＲＮＡ聚合酶的σ３８亚单位在特异启动子的－３５区识别的保守序列是－ＴＣＴＣＣＣ－，合成用其它碱基分别取代这一区域每一个碱基的引物，以ｏｓｍＹ基因片段为模板，通过ＰＣＲ扩增成－３５区含不同碱基序列的转录模板，用体外重组的由σ３８和核心酶（Ｅ）组成的全酶（Ｅσ３８）对这些启动子进行体外转录．结果显示含－ＴＣＴＣＣＣ－序列的启动子的转录水平既低于原始的ｏｓｍＹ启动子，又低于经ＰＣＲ扩增的其它序列．综合研究结果推测，这一区域的保守序列是－ＴＣＴＣＴＣ－． 展开更多

关键词 体外转录 RNA聚合酶 Σ因子 启动子保守序列

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AcMNPV突变株的蛋白表达时相研究

8

作者 丁清泉 方勤 +3 位作者 RenéeLapointe 戴顺英 赵小东 Eric B.Carstens 《中国病毒学》 CSCD 2003年第1期35-38,共4页

将苜蓿银纹夜蛾多核衣壳核型多角体病毒(Autograph Colifornica nuclear polyhedrosis virus,AcMNPV)的野生型株HR3和温度敏感突变株ts317、ts538、ts8感染草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)Sf21细胞,并在允许温度(25℃)或非允许温度(3... 将苜蓿银纹夜蛾多核衣壳核型多角体病毒(Autograph Colifornica nuclear polyhedrosis virus,AcMNPV)的野生型株HR3和温度敏感突变株ts317、ts538、ts8感染草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)Sf21细胞,并在允许温度(25℃)或非允许温度(33℃)下培养,分别采用过氧化物酶标记的抗P47蛋白、抗P143蛋白、抗多体蛋白和抗病毒结构蛋白的单克隆抗体检测病毒增殖过程各蛋白出现的时间。结果表明:1)P47蛋白是一种晚期(12hpi)表达蛋白,各突变株在允许温度(25℃)能够表达,但在非允许温度(33℃)不能表达。2)P143蛋白是一种早期(8hpi)表达蛋白,在允许温度和非允许温度时都能表达,ts8的表达量较少。3)在非允许温度条件下,蛋白质的合成速度高于允许温度。4)野生型和突变株ts317的病毒结构蛋白(P80、GP64、VP39、P24和PTP)在允许温度增殖下都能检测到,ts538和ts8表达量相对少些。5)除了GP64和P24外,ts538和ts8感染的细胞在非允许温度下不能表达病毒的结构蛋白。6)野生型毒株HR3在允许温度和非允许温度下的蛋白表达无明显差异。 展开更多

关键词 苜蓿银纹夜蛾多衣壳核型多角体病毒 MNPV 蛋白表达 温度敏感突变株

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大肠杆菌RNA聚合酶的分子研究进展

9

作者 丁清泉 戴顺英 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期52-58,共7页

关键词 大肠杆菌 RNA聚合酶 分子研究

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rmf基因启动子识别因子选择性研究

10

作者 丁清泉 石浜明 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期21-25,共5页

分别用σ^(70)或σ^(38)因子和核心酶(Core enzyme)重建RNA聚合酶全酶(Holoenzyme)对含有rmf基因启动子的DNA模板进行体外转录。不同的限制性内切酶酶切片段模板证实了rmf基因转录起始位点,尽管rmf基因在大肠杆菌进入稳定期大量表达,但... 分别用σ^(70)或σ^(38)因子和核心酶(Core enzyme)重建RNA聚合酶全酶(Holoenzyme)对含有rmf基因启动子的DNA模板进行体外转录。不同的限制性内切酶酶切片段模板证实了rmf基因转录起始位点,尽管rmf基因在大肠杆菌进入稳定期大量表达,但是其启动子对稳定期起重要作用的σ^(38)因子的识别能力很低,而只能被σ^(70)所识别。rmf基因启动子体外转录的最适温度为37℃,最适NaCl浓度为50mmol/L。 展开更多

关键词 体外转录 核糖体调节因子 rmf基因 启动子

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草鱼呼肠孤病毒新分离株(GCRV_(991))的病毒学特性分析 被引量：17

11

作者 方勤 肖调义 +3 位作者 丁清泉 李旅 章怀云 朱作言 《中国病毒学》 CSCD 2002年第2期179-181,共3页

从湖南长沙分离到一株致病性强的草鱼呼肠孤病毒 (GCRV991) ,该病毒能使草鱼CIK ,肥头鲤FHM细胞产生明显的CPE ,对水生动物BF2 ,EPC及哺乳动物BHK ,VERO细胞株不敏感。中和实验显示 ,GCRV873 抗体能有效地中和GCRV991病毒颗粒 ,形成抗... 从湖南长沙分离到一株致病性强的草鱼呼肠孤病毒 (GCRV991) ,该病毒能使草鱼CIK ,肥头鲤FHM细胞产生明显的CPE ,对水生动物BF2 ,EPC及哺乳动物BHK ,VERO细胞株不敏感。中和实验显示 ,GCRV873 抗体能有效地中和GCRV991病毒颗粒 ,形成抗原抗体免疫复合物。纯化的病毒核酸与蛋白经SDS PAGE分离 ,分别呈现 11条清晰的核酸带及 5条主要与 2条微量结构多肽图谱 ,其核酸蛋白分子量大小与GCRV873 相近似。该毒株基因组总分子量为 14.48× 10 6kD ,大小范围是 0 .5 5～ 2 .6 1× 10 6kD ;5条主要与两条微量结构多肽分子量近似值分别为136kD、132kD、6 5kD、43kD、34kD及 138kD、82kD。上述结果提示 ,新分离的GCRV991与GCRV873 展开更多

关键词 草鱼呼肠孤病毒 分离株 GCRV991 病毒学特性

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两株水生呼肠孤病毒部分特性的比较 被引量：7

12

作者 方勤 丁清泉 +1 位作者 汪亚平 朱作言 《中国病毒学》 CSCD 2003年第5期464-467,共4页

水生呼肠孤病毒为感染水生动物的一类病原体,隶属于呼肠孤病毒科新建水生呼肠孤病毒属。草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)是引起中国南方淡水养殖草鱼暴发性出血病病原,鲅鱼呼肠孤病毒(Threadfin reovirus,TFV)是引起海水养殖... 水生呼肠孤病毒为感染水生动物的一类病原体,隶属于呼肠孤病毒科新建水生呼肠孤病毒属。草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)是引起中国南方淡水养殖草鱼暴发性出血病病原,鲅鱼呼肠孤病毒(Threadfin reovirus,TFV)是引起海水养殖鲅鱼病毒病病原。本研究将GCRV与新加坡TFV分离株进行了部分特性比较研究。结果表明,GCRV与TFV均能感染CIK细胞,但对其它鱼类细胞系的敏感性有所差异。此外,凝胶电泳与逆转录聚合酶链式扩增显示,GCRV与TFV核酸属不同的基因型。在多肽特性上,证实了GCRV的5条主要结构多肽具有与FTV及水生呼肠孤病毒相似的特性。Western blot检测显示,草鱼呼肠孤病毒与TFV结构蛋白拥有部分相同的抗原决定簇。 展开更多

关键词 水生呼肠孤病毒 草鱼呼肠孤病毒 鲅鱼呼肠孤病毒 特性

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棉铃虫核多角体病毒iap2基因的克隆和序列分析 被引量：5

13

作者 张小霞 张忠信 丁清泉 《中国病毒学》 CSCD 2001年第4期338-343,共6页

棉铃虫核多角体病毒 (Helicoverpaarmigerasinle nucleocapsidnucleopolyhedrovirus,HaSNPV)基因组中发现了一个抗细胞凋亡基因iap2。该基因位于病毒基因组的BamHI F片段 ,全长 75 3个核苷酸 ,编码 2 5 0个氨基酸 ,预计蛋白质分子量 2 9... 棉铃虫核多角体病毒 (Helicoverpaarmigerasinle nucleocapsidnucleopolyhedrovirus,HaSNPV)基因组中发现了一个抗细胞凋亡基因iap2。该基因位于病毒基因组的BamHI F片段 ,全长 75 3个核苷酸 ,编码 2 5 0个氨基酸 ,预计蛋白质分子量 2 9.2kD。在iap2基因上游 - 30～ - 33的位置有一个TATA框 ,在 5 0～ 5 3的位置有一个早期转录信号CAAT ,在终止密码子下游有一个poly(A)信号AATAAA ,HaSNPViap2基因编码一个锌指结构和两个BIR结构。与LdMNPV、AcMNPV、SeMNPV和OpMNPV的IAPs及果蝇DIAP2和人类XIAP等九种IAPs相比较 ,HaSNPVIAP2与其它的BIR(baculovirusIAPrepeater)和RING结构在Cys/His基元 (motif) 展开更多

关键词 棉铃虫 核多角体病毒 细胞凋亡 BIRs 锌指结构 IAP iap2 基因序列 克隆

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棉铃虫核多角体病毒lef-3基因的序列分析 被引量：4

14

作者 张小霞 梁振普 +2 位作者 牛国栋 张忠信 丁清泉 《中国病毒学》 CSCD 2002年第3期234-238,共5页

在棉铃虫核多角体病毒 (HelicoverpaarmigeraSingle nucleocapsidNucleopolyhedrovirus ,HaSNPV)基因组中发现了lef 3基因 ,该基因位于病毒基因组的BamHⅠ F片段上 ,全长 114 0bp ,编码 379个氨基酸 ,预计蛋白质分子量为 4 4kD ,启动... 在棉铃虫核多角体病毒 (HelicoverpaarmigeraSingle nucleocapsidNucleopolyhedrovirus ,HaSNPV)基因组中发现了lef 3基因 ,该基因位于病毒基因组的BamHⅠ F片段上 ,全长 114 0bp ,编码 379个氨基酸 ,预计蛋白质分子量为 4 4kD ,启动子区具有TATAbox ,位于起始密码子ATG上游 4 0～ 4 3nt处 ,在终止密码子下游具典型的 poly(A)终止信号AATAAA。并且在它的氨基酸序列的N 展开更多

关键词 棉铃虫核多角体病毒 lef-3基因 序列分析

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三株草鱼出血病病毒免疫原性的比较 被引量：3

15

作者 柯丽华 余兰芬 +2 位作者 方勤 丁清泉 蔡宜权 《中国病毒学》 CSCD 1991年第3期248-251,共4页

从湖南邵阳、湖北仙桃、武汉南湖地区分离到的三株草鱼出血病病毒(GCHV873、GCHV875、GCHV876),分别对家兔进行免疫,并测定了它们在家兔体内形成抗体的水平以及这些抗体对相应抗原的中和能力。实验结果显示:GCHV873产生抗体滴度比GCHV87... 从湖南邵阳、湖北仙桃、武汉南湖地区分离到的三株草鱼出血病病毒(GCHV873、GCHV875、GCHV876),分别对家兔进行免疫,并测定了它们在家兔体内形成抗体的水平以及这些抗体对相应抗原的中和能力。实验结果显示:GCHV873产生抗体滴度比GCHV875高一倍,较GCHV876高8倍;其抗体的中和效价分别是1:1778(10^(-3.25))、1:386(10^-(2.59))和1:181(10^-(2.25))。上述结果表明:GCHV873的免疫原性是三个分离株中最强的一个毒株。 展开更多

关键词 草鱼出血病毒 免疫原性 抗体滴价

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棉铃虫核多角体病毒进化保守性基因iap2基因表达载体的构建及表达 被引量：1

16

作者 张小霞 梁振普 +1 位作者 张忠信 丁清泉 《昆虫知识》 CSCD 北大核心 2003年第1期35-39,共5页

分析棉铃虫核多角体病毒基因组 ,结合GenBank中已知的序列 ,发现iap2基因位于其基因组的BamHⅠ F片段上 ,回收此片段作为模板 ,设计引物 ,通过PCR扩增得到了抗细胞凋亡基因iap2的DNA片段。将扩增产物克隆到pGEM T载体上 ,再进一步将插... 分析棉铃虫核多角体病毒基因组 ,结合GenBank中已知的序列 ,发现iap2基因位于其基因组的BamHⅠ F片段上 ,回收此片段作为模板 ,设计引物 ,通过PCR扩增得到了抗细胞凋亡基因iap2的DNA片段。将扩增产物克隆到pGEM T载体上 ,再进一步将插入片段酶切并连接到表达载体pET 2 8a上 ,构建了重组质粒pET iap2。DNA序列分析结果表明 ,克隆得到的DNA序列与所发表序列完全相同。含重组质粒pET iap2的大肠杆菌BL2 1 (DE3)表达了抗细胞凋亡蛋白IAP2。 展开更多

关键词 棉铃虫核多角体病毒 进化保守性基因 iap2 基因表达载体 构建 表达

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非典-SARS-冠状病毒 被引量：5

17

作者 王汉中 丁清泉 《中国病毒学》 CSCD 2003年第3期303-306,共4页

2002年11月,一种神秘不明的疾病出现在我国广东省继页肆虐全球,世界上有27个国家和地区相继报道出现这种疫情.

关键词 SARS 冠状病毒 非典型肺炎 形态结构 结构蛋白 分子发育树

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呼肠孤病毒内源性转录的结构基础 被引量：8

18

作者 方勤 丁清泉 《中国病毒学》 CSCD 2004年第5期535-539,共5页

关键词 呼肠孤病毒 内源性转录 结构基础

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草鱼出血病病毒的血清学鉴定 被引量：2

19

作者 柯丽华 方勤 +2 位作者 余兰芬 丁清泉 蔡宜权 《中国病毒学》 CSCD 1991年第3期252-255,共4页

草鱼出血病病毒(GcHV)具有弱的凝集人“O”型红血球的能力。其抗体与呼肠孤病毒、轮状病毒不发生免疫反应,说明此病毒与上述病毒无共同的抗原关系。

关键词 草鱼出血病病毒 免疫反应 血凝试验

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草鱼呼肠孤病毒RNA聚合酶基因的表达与产物纯化 被引量：1

20

作者 方勤 丁清泉 +1 位作者 汪亚平 朱作言 《中国病毒学》 CSCD 2003年第2期169-173,共5页

草鱼呼肠孤病毒是引起草鱼出血病的主要病原,隶属于呼肠孤病毒科水生呼肠孤病毒属。序列分析表明,GCRV S2 片段长为3 877核苷酸,编码一个分子量为138kDa 的蛋白VP2,具有RNA聚合酶性质。为进一步了解该病毒 RNA聚合酶特性,本研究在对GCRV... 草鱼呼肠孤病毒是引起草鱼出血病的主要病原,隶属于呼肠孤病毒科水生呼肠孤病毒属。序列分析表明,GCRV S2 片段长为3 877核苷酸,编码一个分子量为138kDa 的蛋白VP2,具有RNA聚合酶性质。为进一步了解该病毒 RNA聚合酶特性,本研究在对GCRV RNA聚合酶基因(GCRV-RdRp)保守区(约1.5kb)重组质粒pR/RRp高效表达的基础上,分别构建了编码GCRV RNA聚合酶保守区N端与C端部分基因的 pR/RRpN及pR/RRpC重组表达载体,并在原核细胞中获得成功表达。筛选的重组表达菌株经IPTG诱导培养,得到分子量分别为98kDa、103kDa的目的表达融合蛋白。Western blot分析表明,该表达产物与兔抗GCRV-VP2血清呈阳性反应。通过ProBond柱亲和层析,纯化了融合有6个组氨酸的重组表达产物,并获得约90%纯的目的蛋白。上述结果为GCRV RNA聚合酶特性分析提供了依据。 展开更多

关键词 草鱼呼肠孤病毒 草鱼 出血病 RNA聚合酶 基因表达 纯化

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