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Tiam1基因沉默对胰腺癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响 被引量：3
1
作者 丁米娜 邓春玲 +2 位作者 李月 朴英实 陈丽艳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第4期843-846,共4页
目的研究沉默T淋巴瘤侵袭转移诱导因子(Tiam)1基因对胰腺癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响,并探讨其可能的分子机制。方法通过RNA干扰(RNAi)技术沉默胰腺癌BxPC-3细胞中Tiam1的表达,Western印迹实验检测其沉默效果;将转染处理过的胰腺癌细胞... 目的研究沉默T淋巴瘤侵袭转移诱导因子(Tiam)1基因对胰腺癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响,并探讨其可能的分子机制。方法通过RNA干扰(RNAi)技术沉默胰腺癌BxPC-3细胞中Tiam1的表达,Western印迹实验检测其沉默效果;将转染处理过的胰腺癌细胞接种于裸鼠皮下,建立胰腺癌皮下移植瘤模型;观察肿瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线,裸鼠处死后,取瘤称重;苏木素-伊红(HE)染色法观察移植瘤组织病理学结构;免疫组织化学染色法(IHC)检测移植瘤组织增殖相关蛋白Ki-67,转移相关蛋白E-钙黏蛋白(cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Slug的表达。结果RNAi技术可有效沉默胰腺癌BxPC细胞中Tiam1的表达,并成功构建胰腺癌裸鼠移植瘤模型;与对照组比较,si-Tiam1组裸鼠肿瘤体积与质量均明显降低(P<0.05);HE染色结果显示,与对照组比较,si-Tiam1组中肿瘤组织出现细胞皱缩、片状坏死等病理性改变;IHC结果显示,与对照组相比,si-Tiam1组移植瘤组织中Ki-67、Vimentin、Slug的表达明显降低,而E-cadherin的表达明显升高。结论沉默Tiam1能有效抑制胰腺癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与Ki-67、Vimentin、Slug表达的降低及E-cadherin的表达增强有关,提示Tiam1有可能成为胰腺癌基因治疗的新靶标。 展开更多
关键词 TIAM1 胰腺癌 移植瘤 上皮间质转化 抑制
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蒲公英萜醇对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及凋亡的影响 被引量：22
2
作者 朱坤 丁米娜 +2 位作者 杨洋 车拴龙 陈丽艳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第17期140-144,共5页
目的:探讨蒲公英萜醇对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:体外培养人乳腺癌细胞MCF-7,采用噻唑蓝比色法和平板克隆实验检测蒲公英萜醇对MCF-7细胞增殖的影响;Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡的形态变化;... 目的:探讨蒲公英萜醇对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:体外培养人乳腺癌细胞MCF-7,采用噻唑蓝比色法和平板克隆实验检测蒲公英萜醇对MCF-7细胞增殖的影响;Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡的形态变化;Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:蒲公英萜醇对人乳腺癌细胞MCF-7有明显的增殖抑制作用(P<0.05);Hoechst染色结果显示,给药后细胞核内染色质凝集,核固缩,可见凋亡小体;Western blot结果显示,蒲公英萜醇可极显著提高Bax/Bcl-2的比值(P<0.01)以及上调活化型Caspase-3/9的表达(P<0.01),下调PARP的表达(P<0.01)。结论:蒲公英萜醇能够明显抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖,并通过线粒体途径诱导其凋亡。 展开更多
关键词 乳腺癌 蒲公英萜醇 凋亡 线粒体途径
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3-甲基腺嘌呤联合曲古霉素A抑制三阴性乳腺癌细胞生长 被引量：5
3
作者 朱坤 徐明 +2 位作者 丁米娜 林贞花 陈丽艳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1524-1527,共4页
目的:探讨自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A(TSA)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231生长的影响及其可能的分子机制。方法:MTT法检测TSA对MDA-MB-231细胞活力的抑制作用;划痕实验检测细胞迁移能力的变... 目的:探讨自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A(TSA)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231生长的影响及其可能的分子机制。方法:MTT法检测TSA对MDA-MB-231细胞活力的抑制作用;划痕实验检测细胞迁移能力的变化;Western blot检测细胞自噬相关蛋白的变化;MTT法检测3-MA联合TSA对细胞活力的影响。结果:TSA可有效抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长,并呈剂量和时间依赖性;TSA抑制MDA-MB-231细胞的迁移能力,并诱导细胞发生自噬;3-MA可有效抑制TSA诱导的乳腺癌细胞自噬,并进一步抑制细胞活力,差异有统计学意义。结论:3-MA可明显增加TSA对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长抑制作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 曲古霉素A 3-甲基腺嘌呤 自唆
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某人防工程通风设计探讨
4
作者 丁米娜 《建筑与环境》 2009年第6期160-161,共2页
引言 人防工程不仅要为战时功能服务，体现其战备效益，而且平时要开放，目前随着人防工程的增多，其内空气品质问题已经引起业内人士的重视，尤其是平时用作商业、娱乐及旅馆的人防工程内部空气品质更是我们所关注的焦点性问题。本文... 引言 人防工程不仅要为战时功能服务，体现其战备效益，而且平时要开放，目前随着人防工程的增多，其内空气品质问题已经引起业内人士的重视，尤其是平时用作商业、娱乐及旅馆的人防工程内部空气品质更是我们所关注的焦点性问题。本文着重对人防工程的设计的探讨。 展开更多
关键词 人防工程 设计探讨 通风 空气品质 品质问题 旅馆
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蒲公英萜醇对乳腺癌细胞增殖及发生氧化应激反应的影响 被引量：8
5
作者 朱坤 丁米娜 +1 位作者 李月 陈丽艳 《当代医药论丛》 2017年第19期10-12,共3页
目的 :探究蒲公英萜醇(Taraxerol)对乳腺癌细胞(MCF-7细胞)增殖及发生氧化应激反应的影响。方法 :将MCF-7细胞接种于96孔板中,在其中4孔的MCF-7细胞中分别加入12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L和200μmol/L的蒲公英萜醇,... 目的 :探究蒲公英萜醇(Taraxerol)对乳腺癌细胞(MCF-7细胞)增殖及发生氧化应激反应的影响。方法 :将MCF-7细胞接种于96孔板中,在其中4孔的MCF-7细胞中分别加入12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L和200μmol/L的蒲公英萜醇,对其中一孔的MCF-7细胞不进行添加蒲公英萜的处理。将未经处理的MCF-7细胞设为对照组(Control组),将其他的MCF-7细胞设为用药组。采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测加入不同浓度的蒲公英萜醇对各用药组细胞增殖的影响,采用探针DCFH-DA检测各组细胞中活性氧(ROS)的变化,采用分光光度法测定各组细胞中上清液乳酸脱氢酶(LDH)及细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果 :进行CCK-8检测的结果显示,在各用药组细胞中加入蒲公英萜醇后的第48 h和第72 h其增殖速度均明显下降,与对照组细胞相比差异有统计学意义,P<0.05。与对照组细胞相比,各用药组细胞中ROS、LDH、MDA的水平均明显上升(P<0.05),其中SOD的水平均明显下降(P<0.05),且在各用药组细胞中加入蒲公英萜醇的浓度越高,其ROS、LDH、MDA、SOD水平的变化幅度越大。结论 :蒲公英萜醇可抑制乳腺癌细胞MCF-7细胞的增殖,其作用机制可能与其能够诱导该细胞发生氧化应激性损伤有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 蒲公英萜醇 氧化应激
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PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235对乳腺癌小鼠移植瘤生长的抑制作用 被引量：1
6
作者 王欢欢 丁米娜 +1 位作者 姜春如 陈丽艳 《科技风》 2018年第3期46-46,共1页
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。NVP-BEZ235是PI3K和mTOR双重靶向抑制剂,具有抑制多种肿瘤恶性进展的作用^([1]),但机制仍不明确。因此,我们利用乳腺癌MCF-7细胞建立小鼠移植瘤模型,观察不同浓度NVP-BEZ235对移植瘤生长的影响,并初... 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。NVP-BEZ235是PI3K和mTOR双重靶向抑制剂,具有抑制多种肿瘤恶性进展的作用^([1]),但机制仍不明确。因此,我们利用乳腺癌MCF-7细胞建立小鼠移植瘤模型,观察不同浓度NVP-BEZ235对移植瘤生长的影响,并初步探讨其机制。 展开更多
关键词 乳腺癌 小鼠 移植瘤
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蒲公英萜醇通过mTOR信号通路诱导乳腺癌细胞自噬 被引量：22
7
作者 朱坤 丁米娜 +2 位作者 李月 朴英实 陈丽艳 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期32-37,共6页
目的:体外研究蒲公英萜醇对乳腺癌MCF-7细胞自噬的影响,并探讨相关作用机制。方法:体外培养乳腺癌MCF-7细胞,通过噻唑蓝(MTT)比色法检测蒲公英萜醇(12. 5,25,50,100,200μmol·L-1)对MCF-7细胞增殖的影响;采用吖啶橙(AO),免疫荧光... 目的:体外研究蒲公英萜醇对乳腺癌MCF-7细胞自噬的影响,并探讨相关作用机制。方法:体外培养乳腺癌MCF-7细胞,通过噻唑蓝(MTT)比色法检测蒲公英萜醇(12. 5,25,50,100,200μmol·L-1)对MCF-7细胞增殖的影响;采用吖啶橙(AO),免疫荧光染色和透射电镜观察蒲公英萜醇对乳腺癌MCF-7细胞自噬的影响;应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测蒲公英萜醇用药后细胞自噬相关蛋白表达以及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的变化情况。结果:MTT比色法结果显示,蒲公英萜醇组可抑制MCF-7细胞的增殖能力;吖啶橙染色结果显示,与空白组比较,蒲公英萜醇组MCF-7细胞内酸性溶酶体增加;透射电镜观察到用药组细胞内出现明显的自噬体结构;蒲公英萜醇用药后,荧光显微镜下可见MCF-7细胞中出现较多的微管相关蛋白1轻链3(LC3)绿色荧光分布;Western blot结果显示,与空白组比较,蒲公英萜醇可上调LC3-Ⅱ和酵母Atg6同系物(Beclin-1)蛋白表达水平,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高(P <0. 05,P <0. 01);加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)后与蒲公英萜醇组比较,3-MA+蒲公英萜组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ降低(P <0. 05)。蒲公英萜醇用药后可显著下调细胞内p-mTOR和磷酸化的真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白(p-4EBP1)蛋白表达水平(P <0. 05,P <0. 01)。结论:蒲公英萜醇能够诱导MCF-7细胞发生自噬,其机制可能与抑制mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 蒲公英萜醇 乳腺癌 自噬 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)
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β-拉帕醌联合BEZ235抑制乳腺癌细胞的增殖及迁移 被引量：1
8
作者 李月 丁米娜 +2 位作者 朱坤 朴俊杰 陈丽艳 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期359-371,共13页
目的 :探讨β-拉帕醌联合BEZ235对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响,及其可能的作用机制。方法 :应用MTT法检测β-拉帕醌单药、BEZ235单药及2药联合对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-468细胞增殖的影响,并计算联合用药指数(combination index,CI);应用... 目的 :探讨β-拉帕醌联合BEZ235对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响,及其可能的作用机制。方法 :应用MTT法检测β-拉帕醌单药、BEZ235单药及2药联合对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-468细胞增殖的影响,并计算联合用药指数(combination index,CI);应用蛋白质印迹法检测增殖相关蛋白Ki67的表达水平;应用平板克隆形成实验检测MCF-7和MDA-MB-468细胞的集落形成能力;应用划痕愈合实验检测MCF-7和MDA-MB-468细胞的横向迁移能力;应用Transwell小室法检测MCF-7和MDA-MB-468细胞的纵向迁移和侵袭能力;应用蛋白质印迹法检测MCF-7和MDA-MB-468细胞中上皮-间质转化相关蛋白的表达。应用血管形成实验检测用β-拉帕醌单药、BEZ235单药及2药联合处理的MCF-7和MDA-MB-468细胞上清液培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)血管形成能力;应用蛋白质印迹法检测β-拉帕醌单药、BEZ235单药及2药联合对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-468细胞中血管形成相关蛋白血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平的影响。结果 :β-拉帕醌单药、BEZ235单药及2药联合处理组MCF-7和MDAMB-468细胞的增殖能力均显著低于未用药物处理的对照组(P值均<0.05);2药的CI值均<1,具有协同作用。β-拉帕醌联合BEZ235处理组MCF-7和MDA-MB-468细胞中Ki67的表达水平均显著低于对照组和各单药组(P值均<0.05)。β-拉帕醌联合BEZ235处理组MCF-7和MDA-MB-468细胞的集落形成数均显著少于对照组和各单药组(P值均<0.05)。β-拉帕醌联合BEZ235处理组MCF-7和MDA-MB-468细胞的横向迁移能力、纵向迁移和侵袭能力均显著低于对照组和各单药组(P值均<0.05)。β-拉帕醌联合BEZ235处理组MCF-7和MDA-MB-468细胞中上皮-间质转化相关蛋白E-cadherin的表达水平均显著高于对照组和各单药组(P值均<0.05),Vimentin和Twist的表达水平均显著低于对照组和各单药组(P值均<0.05)。用β-拉帕醌联合BEZ235处理的MCF-7和MDA-MB-468细胞上清液培养的HUVECs血管形成数均显著少于对照组和各单药组(P值均<0.01),β-拉帕醌联合BEZ235处理组MCF-7和MDA-MB-468细胞中VEGF的表达水平均显著低于对照组和各单药组(P值均<0.05)。结论 :β-拉帕醌联合BEZ235可在体外协同抑制乳腺癌细胞的增殖,并通过血管生成和上皮-间质转化途径抑制细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 上皮-间质转化 肿瘤转移 β-拉帕醌 BEZ235
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