外泌体负载的KV11通过VDAC1和自噬机制对角膜新生血管的抑制作用

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作者 陈文倩 杜玮 于文贞 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期108-116,共9页

目的探讨外泌体(EXO)负载的抗新生血管短肽KV11在角膜新生血管(CNV)中的作用及其机制。方法利用EXO锚定肽CP05将KV11结合到血管内皮来源的EXO膜表面,形成EXO-KV11。通过Apogee纳米流式分析EXO负载KV11的效率和最佳浓度比。选取8周龄SPF... 目的探讨外泌体(EXO)负载的抗新生血管短肽KV11在角膜新生血管(CNV)中的作用及其机制。方法利用EXO锚定肽CP05将KV11结合到血管内皮来源的EXO膜表面,形成EXO-KV11。通过Apogee纳米流式分析EXO负载KV11的效率和最佳浓度比。选取8周龄SPF级健康雄性SD大鼠100只,其中10只大鼠不做任何处理,为正常对照组;其余大鼠在建立碱烧伤诱导CNV大鼠模型后,采用随机数字表法随机将大鼠分为EXO-KV11组、KV11组和生理盐水组,每组各30只。从碱烧伤后第1天开始每隔1天,各组分别结膜下注射100μl EXO-KV11(25μg)、KV11(25μg)或生理盐水。观察第1、4、7、14天时CNV的生成情况;采用荧光素心室灌注、角膜血管造影法计算CNV面积;采用苏木精-伊红染色法观察各组CNV管腔数量;采用免疫组织化学法检测角膜组织中CD31的表达分布;采用Western blot法检测电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)和内质网应激、自噬及凋亡相关蛋白的表达水平。结果Apogee流式分析确定KV11与EXO最佳浓度比为4∶1,EXO负载KV11效率高达87.5%。碱烧伤后7 d和14 d,各组CNV面积总体比较差异均有统计学意义(F=4.613、15.590,均P<0.05),其中碱烧伤后7 d,EXO-KV11组CNV面积小于KV11组和生理盐水组;碱烧伤后14 d,EXO-KV11组和KV11组CNV面积均小于生理盐水组,EXO-KV11组CNV面积小于KV11组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。角膜荧光铺片定量分析结果显示,生理盐水组、KV11组和EXO-KV11组CNV相对荧光面积分别为(8.3±1.7)%、(5.2±1.6)%和(3.4±0.7)%,总体比较差异有统计学意义(F=11.735,P<0.01),其中KV11组和生理盐水组CNV相对荧光面积均大于EXO-KV11组,生理盐水组CNV相对荧光面积大于KV11组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。碱烧伤后14 d,生理盐水组基质内可见大量新生血管管腔;KV11组基质内新生血管管腔数量较生理盐水组少;EXO-KV11组角膜结构趋于正常,少见新生血管管腔。生理盐水组角膜基质内可见大量CD31染色阳性细胞,细胞围成大小不一的管腔结构;KV11组角膜基质内CD31染色阳性细胞围成的管腔数量较生理盐水组少,EXO-KV11组管腔数量较KV11组少。EXO-KV11组、KV11组、生理盐水组和正常对照组VDAC1、蛋白质激酶R样内质网激酶(PERK)、自噬接头蛋白(SQSTM1/p62)、活化半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase 3)相对表达量总体比较差异均有统计学意义(F=35.960、8.947、17.791、101.168,均P<0.01),其中EXO-KV11组VDAC1、PERK、p62、cleaved caspase 3相对表达量高于KV11组和生理盐水组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。各组自噬微管相关蛋白轻链3B(LC3B)Ⅱ/LC3BⅠ蛋白相对表达量总体比较,差异无统计学意义(F=0.445,P=0.727)。结论与KV11相比,EXO-KV11可通过增加VDAC1表达、刺激PERK产生、抑制自噬流的发生等机制更有效地抑制CNV。 展开更多

关键词 角膜新生血管 自噬 外泌体 纤溶酶原kringle 5 电压依赖性阴离子通道1

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玻璃体切割联合硅油填充与C3F8填充治疗高度近视黄斑裂孔视网膜脱离临床效果比较 被引量：11

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作者 于文贞 孙摇遥 +6 位作者 李娟 赵敏 黎晓新 姜燕荣 赵明威 梁建宏 尹虹 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1036-1039,共4页

背景高度近视黄斑裂孔视网膜脱离（MHRD）可造成严重的视力下降，经睫状体平坦部的玻璃体切割术联合眼内填充术已应用于该病的临床治疗，目前常用的眼内填充物包括硅油及可膨胀性气体C3F8，两种填充物的效果比较仍缺少相关研究证据。目... 背景高度近视黄斑裂孔视网膜脱离（MHRD）可造成严重的视力下降，经睫状体平坦部的玻璃体切割术联合眼内填充术已应用于该病的临床治疗，目前常用的眼内填充物包括硅油及可膨胀性气体C3F8，两种填充物的效果比较仍缺少相关研究证据。目的评价玻璃体切割联合硅油填充与C3F8填充治疗高度近视黄斑裂孔视网膜脱离的手术效果。方法采用回顾性病例对照设计。对采用玻璃体切割联合眼内填充术治疗的51例高度近视MHRD患者，根据术中眼内填充物的不同将患者分为硅油填充组和C3F8填充组，两组患者基线资料一致。对两组术眼术后的最佳矫正视力（BCVA）、视网膜复位率、黄斑裂孔闭合情况及视网膜脱离复发率进行分析和比较。结果两组患者术前视力差异无统计学意义（U=266．000，P=0．286），基线视力一致，术中不同眼内填充物治疗后视力差异亦无统计学意义（U=205．000，P=0．029）；应用硅油填充及C3F8填充患者BCVA术后与术前相比均有显著提高，差异均有统计学意义（Z=-2．729，P=0．006；Z=-3．273，P=0．001），两组患者术后视网膜脱离发生率及黄斑裂孔解剖闭合率差异均无统计学意义（P=0．894、1．000）。患者除自内障外无其他并发症发生。结论应用C3F8填充治疗高度近视MHRD与硅油填充治疗效果相同，且均安全、有效。 展开更多

关键词 高度近视 黄斑裂孔视网膜脱离 玻璃体切割 硅油 C3F8

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眼部色素上皮培养与移植的最新进展 被引量：4

3

作者 于文贞 董晓光 谢立信 《眼科新进展》 CAS 2001年第1期52-54,共3页

关键词 色素上皮 培养 移植 视网膜

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PI3K抑制剂对体外培养的眼底血管内皮细胞的作用 被引量：2

4

作者 于文贞 黎晓新 +1 位作者 周国宏 何培英 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2007年第2期117-120,共4页

目的观察PI3K激酶抑制剂LY294002对体外培养的视网膜脉络膜血管内皮细胞增生和迁移抑制以及诱导凋亡的作用。方法四唑盐(MTT)比色法检查对照组和LY294002干预组干预72h后RF/6A细胞增生的抑制,Transwell分析法检查不同浓度的LY294002对V... 目的观察PI3K激酶抑制剂LY294002对体外培养的视网膜脉络膜血管内皮细胞增生和迁移抑制以及诱导凋亡的作用。方法四唑盐(MTT)比色法检查对照组和LY294002干预组干预72h后RF/6A细胞增生的抑制,Transwell分析法检查不同浓度的LY294002对VEGF诱导的RF/6A细胞迁移的抑制效果,流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果LY294002以浓度依赖性方式抑制VEGF诱导的RF/6A细胞增生和迁移,各个LY294002干预组与对照组相比,增生和迁移能力降低,差异有统计学意义(P<0.05),流式细胞仪分析结果显示LY294002可以诱导细胞的凋亡。结论LY294002可抑制体外培养的RF/6A细胞的生长和迁移,并诱导细胞的凋亡,有望为临床上新生血管性疾病提供新的治疗方法。 展开更多

关键词 LY294002 血管内皮细胞 迁移 增生 凋亡

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视网膜移植的研究进展 被引量：1

5

作者 于文贞 董晓光 谢立信 《眼科新进展》 CAS 2000年第4期302-304,共3页

关键词 视网膜移植 神经上皮 神经节细胞 感光细胞

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眼部肾素-血管紧张素系统的研究 被引量：5

6

作者 于文贞 董晓光 谢立信 《国外医学（眼科学分册）》 2000年第4期231-235,共5页

肾素-血管紧张素系统是维持体内电解质平衡及血管抗性的主要因素 ,但在眼部的生理作用仍不清楚。本文对这一系统在眼部产生部位 。

关键词 眼部 肾素-血管紧张素系统 生理 病理 诊断价值

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玻璃体腔注射avastin治疗视网膜分支静脉阻塞继发黄斑水肿疗效观察 被引量：30

7

作者 钱彤 黎晓新 +3 位作者 尹虹 梁建宏 齐慧君 于文贞 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2010年第1期79-82,共4页

目的评估玻璃体腔注射avastin治疗视网膜分支静脉阻塞（BRVO）继发黄斑水肿的疗效。方法回顾性分析玻璃体腔注射1．25mg（0．05mL）avastin治疗BRVO继发黄斑水肿患者39例（39眼）。治疗前及治疗后1、2、3d，3、6、12周进行最佳矫正视力... 目的评估玻璃体腔注射avastin治疗视网膜分支静脉阻塞（BRVO）继发黄斑水肿的疗效。方法回顾性分析玻璃体腔注射1．25mg（0．05mL）avastin治疗BRVO继发黄斑水肿患者39例（39眼）。治疗前及治疗后1、2、3d，3、6、12周进行最佳矫正视力（BCVA）、眼压、裂隙灯及间接检眼镜检查。治疗前及治疗后6周、12周行光学相干断层扫描（OCT）、彩色眼底照相、荧光素眼底血管造影（FFA）检查。有29、11、2眼分别注射2、3、4次。随访时间3～20个月，平均（4．78±3．91）个月。对比分析治疗前后患者视力及黄斑中心视网膜厚度（CMT）的改变。结果Avastin玻璃体内注射3、6、12周BCVA均提高，差异均有统计学意义（t=-6．039，-6．182，-4．189，P=0．000）。Avastin玻璃体内注射6周、12周时CMT平均值均明显减低（t=8．684，5．019，P=0．000）。治疗前病程≤1个月的患者，治疗后3周，视力平均值比病程〉1个月的患者显著提高（P〈0．05）。治疗前黄斑灌注良好者CMT降低的效果可保持到术后12周，无灌注区组CMT降低的效果保持到术后6周。随访中未见与注射及药物有关的眼部和全身不良反应。结论Avastin玻璃体腔注射治疗BRVO引起的黄斑水肿安全有效，病程短者效果则更好。 展开更多

关键词 AVASTIN 视网膜分支静脉阻塞 黄斑水肿

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年龄相关性黄斑变性危险因素的病例对照研究 被引量：13

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作者 田君 方凯 +7 位作者 秦雪英 陈卿 李娟 于文贞 侯婧 陈大方 胡永华 黎晓新 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期588-593,共6页

目的:探索年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)的潜在影响因素。方法:采用以医院为基础的多中心病例对照研究设计,使用统一的问卷调查年龄、性别等一般人口学资料,AMD家族史,疾病史及吸烟、饮酒等行为因素;使用... 目的:探索年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)的潜在影响因素。方法:采用以医院为基础的多中心病例对照研究设计,使用统一的问卷调查年龄、性别等一般人口学资料,AMD家族史,疾病史及吸烟、饮酒等行为因素;使用标准化的方法进行体格检查、血生化检查和眼科检查;使用卡方检验分析病例组(545人)和对照组(480人)中各影响因素的分布差异。结果:有AMD家族史者患AMD的危险性是无家族史者的4.21倍(P<0.001),有气管炎/哮喘病史者患AMD的危险性是无该病史者的1.87倍(P=0.008),吸烟者患AMD的危险性是不吸烟者的1.91倍(P<0.001),饮酒者患AMD的危险性是不饮酒者的1.53倍(P=0.003)。在血生化指标中,总蛋白(P=0.004)、高密度脂蛋白胆固醇(P=0.016)和载脂蛋白A1(P=0.012)水平与AMD之间存在相关性。结论:家族史、气管炎/哮喘病史、吸烟和饮酒是AMD的危险因素;总蛋白、高密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白A1水平与AMD有相关性。 展开更多

关键词 黄斑变性 危险因素 病例对照研究

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高密度脂蛋白胆固醇与年龄相关性黄斑变性关联关系的孟德尔随机化研究 被引量：7

9

作者 秦雪英 田君 +6 位作者 方凯 李娟 于文贞 侯婧 陈大方 黎晓新 胡永华 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期407-411,共5页

目的:探索血清高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)与年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)的关联关系。方法:在全国多所医院收集AMD病例和对照样本,通过眼科检查确诊AMD,收集的资料... 目的:探索血清高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)与年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)的关联关系。方法:在全国多所医院收集AMD病例和对照样本,通过眼科检查确诊AMD,收集的资料包括研究对象的一般人口学特征、行为因素、体格检查、抽血测定血清HDL-C水平等,还对血标本进行遗传易感性检测。采用孟德尔随机化方法,以肝酯酶基因(hepatic lipase gene,LIPC)的功能性突变位点rs10468017作为工具变量,分析HDL-C与AMD的关系。结果:研究共纳入545名AMD患者和480名对照。LIPC不同基因型之间,研究对象的年龄、性别、居住地、吸烟、饮酒、饮茶、体质指数的分布差异均无统计学意义(P>0.05),满足作为工具变量的条件。应用传统的回归模型得到,血清HDL-C与AMD关联的OR值为2.00(95%CI:1.41～2.86),孟德尔随机化方法中得到的OR值为7.15(95%CI:0.80～64.13)。结论:与既往研究结果不同,本研究采用孟德尔随机化方法未发现观察性研究中血清HDL-C水平升高与AMD呈正相关的结果。 展开更多

关键词 黄斑变性 胆固醇 高密度脂蛋白 脂肪酶 肝 孟德尔随机化

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槲皮素对高压氧诱导的人晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用 被引量：5

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作者 畅立斌 鲍永珍 +2 位作者 陈宜 于文贞 黎晓新 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期485-489,共5页

背景氧化应激诱导的晶状体上皮细胞（LECs）凋亡与c—Jun氨基末端激酶（JNK）细胞信号通路有关；槲皮素能抑制JNK细胞信号通路并且有显著的抗氧化作用，但其对高压氧诱导的人LECs损伤有无保护作用有待研究。目的研究高压氧诱导人LECs凋... 背景氧化应激诱导的晶状体上皮细胞（LECs）凋亡与c—Jun氨基末端激酶（JNK）细胞信号通路有关；槲皮素能抑制JNK细胞信号通路并且有显著的抗氧化作用，但其对高压氧诱导的人LECs损伤有无保护作用有待研究。目的研究高压氧诱导人LECs凋亡的作用及槲皮素对高压氧处理的人LECs的保护作用，探讨JNK细胞信号通路在上述过程中的作用。方法人LECs细胞系SRA01／04在MEM培养基中进行培养，传至第3代进行实验。实验细胞分为空白对照组、高压氧组（体积分数99％O2＋体积分数1％CO2）、高压氧＋SP600125组和高压氧＋槲皮素组，实验前2h分别在后2个组人LECs培养基中加入20μmol／L JNK2特异性抑制剂（SP600125）或1μmol／L槲皮素预孵育，除空白对照组外，其他3个组于588kPa高压氧舱处理6h后收集人LECs。应用MTT法检测各组人LECs的细胞活力，以570nm处吸光度（A）值表示。用流式细胞仪以Annexin V—FITC试剂盒检测人LECs处理后各组细胞的凋亡率，通过Western blot法检测各组人LECs中JNK／p—JNK、c—Jun／p—c— Jun、caspase-3、caspase-9的蛋白表达情况。结果实验6h后，高压氧组、高压氧＋SP600125组、高压氧＋槲皮素组人LECs活力分别为0．450±0．083、0．654±0．079、0．649±0．090，明显低于空白对照组（0．835±0．082），差异均有统计学意义（P：0．001）；高压氧＋SP600125组、高压氧＋槲皮素组人LECs活力明显高于高压氧组（P=0．003、0．002）。高压氧组、高压氧＋SP600125组、高压氧＋槲皮素组人LECs凋亡数分别为19．77±1．44、8．45±0．93、7．79±0．78，明显高于空白对照组的3．17±0．74，差异有统计学意义（P=0．000）；高压氧＋SP600125组、高压氧＋槲皮素组人LECs细胞凋亡数明显少于高压氧组，差异均有统计学意义（P=0．000）。同时，高压氧组人LECs中p-JNK、p-c—Jun、oaspase-3和caspase-9蛋白的表达量明显高于空白对照组，差异均有统计学意义（P=0．000），而高压氧＋SP600125组、高压氧＋槲皮素组人LECs中p-JNK、p—c—Jun、caspase-3和caspase-9蛋白的表达量明显低于高压氧组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论JNK细胞信号通路在高压氧诱导的人LECs凋亡发生发展中起重要作用，SP600125和低浓度的槲皮素能抑制JNK细胞通路和细胞内源性凋亡途径，减轻高压氧引起的人LECs损伤。 展开更多

关键词 槲皮素 高压氧 晶状体上皮细胞 氨基末端激酶 凋亡

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左旋多巴对形觉剥夺性弱视猫视皮层17区神经生长因子的影响 被引量：5

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作者 郑煜 黎晓新 +2 位作者 牛兰俊 于文贞 董建强 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期988-991,共4页

目的观察左旋多巴对猫形觉剥夺性弱视的治疗作用及其对视皮层17区神经生长因子(NGF)表达的影响。方法18只4周龄幼猫分为正常组、单眼剥夺组、左旋多巴组,每组6只。通过单眼眼睑缝合制备形觉剥夺弱视模型,观察不同干预条件下各组视觉诱... 目的观察左旋多巴对猫形觉剥夺性弱视的治疗作用及其对视皮层17区神经生长因子(NGF)表达的影响。方法18只4周龄幼猫分为正常组、单眼剥夺组、左旋多巴组,每组6只。通过单眼眼睑缝合制备形觉剥夺弱视模型,观察不同干预条件下各组视觉诱发电位(P-VEP)的P1隐含值及波幅,应用免疫组织化学法测定各组视皮层17区NGF的差异。结果单眼剥夺组剥夺眼P100波隐含值延长,波幅降低,与正常组及对侧眼比较,差异均有统计学意义(P<0.01),左旋多巴组双眼P-VEP各指标与正常组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。剥夺组视皮层NGF免疫阳性细胞密度为80.23±9.54,正常组为111.83±7.49,2组比较差异有统计学意义(P<0.01);左旋多巴组为118.06±12.37,与正常组比较差异无统计学意义(P=0.94)。结论敏感期内剥夺性弱视幼猫视皮层17区NGF的表达减弱。左旋多巴干预治疗后,NGF表达明显增加,弱视眼P-VEP明显改善,左旋多巴能促进实验猫弱视眼的视功能改善。 展开更多

关键词 左旋多巴 形觉剥夺性弱视 神经生长因子 视皮层

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光学相干断层扫描在评估特发性黄斑前膜患者术后视力改善中的应用价值 被引量：20

12

作者 郭丽莉 于文贞 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期66-69,共4页

背景 特发性黄斑前膜（IMEM）发病率高,严重影响患眼的视功能,玻璃体切割术是其治疗的主要方法,但关于其术后视力预测的研究较少. 目的 对IMEM进行玻璃体切割联合膜剥除手术患眼的临床资料进行分析,评价IMEM患者手术前后光学相干断层扫... 背景 特发性黄斑前膜（IMEM）发病率高,严重影响患眼的视功能,玻璃体切割术是其治疗的主要方法,但关于其术后视力预测的研究较少. 目的 对IMEM进行玻璃体切割联合膜剥除手术患眼的临床资料进行分析,评价IMEM患者手术前后光学相干断层扫描（OCT）测量的黄斑中心凹厚度（CFT）变化与术后视力改善的关系.方法 采用回顾性研究方法,收集2009年3月至2013年5月在北京大学人民医院确诊为IMEM且行玻璃体切割手术、并完成随访的病例48例49眼的临床资料.患者依据术前OCT图像中视网膜色素上皮（RPE）层、视网膜光感受器内节/外节（IS/OS）及外界膜（ELM）层反光条带是否完整分为完整组（17例18眼）及不完整组（31例31眼）,记录患眼手术前OCT测量的CFT值和LogMAR视力,并与术后12周的结果进行比较,分析术眼手术前后CFT值变化与视力改善程度的关系,评价术前OCT测量的CFT值在预测术眼术后视力改善程度方面的应用价值. 结果 术后12周,完整组18眼的OCT图像显示RPE层、IS/OS层及ELM层均仍完整,而不完整组OCT图像RPE层反光条带不连续者由术前的6眼减少到1眼,IS/OS层反光条带不连续者由术前的29眼减少到19眼,ELM层反光条带不连续者由术前的27眼减少到15眼（各层的不连续眼数有重复）.术眼视力的增加值随着CFT值的减少而增加,二者间呈显著负相关（R2 =0.298,B=0.001,P=0.000）,CFT每减少100 μm,术后LogMAR视力提高1行.完整组患眼术前平均LogMAR最佳矫正视力（BCVA）为0.4±0.19,术后为0.36±0.21,差异无统计学意义（t=0.876,P=0.393）.不完整组术前平均logMAR BCVA为0.82±0.41,术后为0.46±0.26,差异有统计学意义（t=6.206,P=0.000）.不完整组患眼术后视力的改善程度为0.3,优于完整组的0.0. 结论 IMEM术眼手术前后OCT测量视网膜外层结构的连续性及CFT的变化均与患眼视力改善的程度明显相关,术前视网膜外层结构连续者术后预后较好,而术前视网膜外节结构不连续者术后多数可以得到明显改善,包括结构和视力.术前OCT检查在评价IMEM患者术后视力预后方面有一定价值. 展开更多

关键词 计算机体层成像 光学相干断层扫描 视力 预后 特发性黄斑前膜 玻璃体切割术

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整合素连接激酶与缺氧状态下VEGF表达的实验研究 被引量：4

13

作者 邹贺 黎晓新 +3 位作者 于文贞 闫征 何培英 张晓光 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期592-595,共4页

目的探讨缺氧状态下整合素连接激酶(ILK)的表达是否增高以及这种增高与血管内皮生长因子(VEGF)的表达上调是否相关。方法将恒河猴视网膜脉络膜血管内皮细胞(RF/6A)置于94%N2、5%CO2和1%O2的低氧环境,检测0、1、2、3、4hILK,HIF-1α和VEG... 目的探讨缺氧状态下整合素连接激酶(ILK)的表达是否增高以及这种增高与血管内皮生长因子(VEGF)的表达上调是否相关。方法将恒河猴视网膜脉络膜血管内皮细胞(RF/6A)置于94%N2、5%CO2和1%O2的低氧环境,检测0、1、2、3、4hILK,HIF-1α和VEGF的mRNA及蛋白表达水平,进一步用LY294002抑制ILK的活性或RNA干扰抑制ILK的表达后再次检测缺氧4h上述3种因子的表达情况。结果在缺氧0hILK、HIF-1α和VEGF的mRNA及蛋白表达均较低,而缺氧1～4hILK、HIF-1α和VEGF的mRNA及蛋白表达均明显增高,但这种增高都会因为ILK的表达或活性受到抑制而被抑制。结论缺氧状态下在RF/6A细胞中ILK的表达增高,并且ILK的表达增高也会使HIF-1α和VEGF表达上调,说明ILK参与缺氧状态下RF/6A细胞VEGF的表达。 展开更多

关键词 整合素连接激酶 缺氧 血管内皮生长因子

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整合素在糖尿病视网膜病变中的作用研究进展 被引量：5

14

作者 苗恒(综述) 于文贞 黎晓新(审校) 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期186-191,共6页

整合素是一种存在于细胞膜上用以介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质问相互作用的跨膜蛋白，其活化并与相应的配体结合后会引起大量细胞骨架蛋白和细胞内信号分子的功能和活性改变，与多种生长因子在受体水平相互作用，并在下游细胞信号... 整合素是一种存在于细胞膜上用以介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质问相互作用的跨膜蛋白，其活化并与相应的配体结合后会引起大量细胞骨架蛋白和细胞内信号分子的功能和活性改变，与多种生长因子在受体水平相互作用，并在下游细胞信号转导通路中与其多处相交通，形成网状细胞信号转导体系，共同参与调控细胞的黏附、存活、生长、分化、增生和迁移等行为。糖尿病视网膜病变（DR）与生长因子以及由生长因子介导的血管内皮细胞增生、迁移以及新生血管形成有着密切关系。鉴于生长因子、生长因子受体与整合素间存在多种相互作用，整合素又与细胞迁移有着直接关系，未来整合素拮抗疗法可能会成为DR治疗的研究重点。就整合素的细胞信号转导通路、整合素与生长因子、整合素在DR中作用的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 整合索/拮抗 糖尿病视网膜病变 新生血管 生长因子 生长因子受体

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整合素连接激酶对视网膜色素上皮细胞生长、凋亡和分泌功能的影响 被引量：3

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作者 郭丽莉 于文贞 +5 位作者 黎晓新 周玮琰 谢万坤 赵敏 陈欢 何培英 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期729-733,共5页

背景 玻璃体视网膜手术后视网膜色素上皮（RPE）细胞的增生和移行是增生性玻璃体视网膜病变（PVR）发生的主要病理机制,干预RPE细胞的生物学行为对于PVR的靶向治疗有重要意义. 目的 观察整合素连接激酶（ILK）对RPE细胞生长、凋亡及分... 背景 玻璃体视网膜手术后视网膜色素上皮（RPE）细胞的增生和移行是增生性玻璃体视网膜病变（PVR）发生的主要病理机制,干预RPE细胞的生物学行为对于PVR的靶向治疗有重要意义. 目的 观察整合素连接激酶（ILK）对RPE细胞生长、凋亡及分泌血管内皮生长因子（VEGF）的影响. 方法 用低糖DMEM培养基常规培养和传代人RPE D407细胞系,选择50代以内的细胞进行实验.应用特异性敲减ILK的小干扰RNA（siRNA） （ILK-siRNA）与100μl无血清培养基和RPE细胞共培养的方式转染RPE细胞作为实验组,应用非特异性siRNA转染RPE细胞作为对照组,分别将24孔板置于37℃、体积分数5％ CO2孵箱中孵育.转染48 h后,应用MTT比色法检测各组RPE细胞活力；应用流式细胞仪检测RPE细胞的生长周期及细胞凋亡情况；采用Western blot法检测并比较各组RPE细胞中cyclin D1和caspase-3表达水平的变化；应用ELISA法检测并比较各组RPE细胞分泌VEGF水平的变化. 结果 转染siRNA 48 h后,MTT法检测见实验组和对照组RPE细胞活力分别为（43.69±0.89）％和（73.95±1.20）％,实验组比对照组降低了40.92％,差异有统计学意义（t=49.524,P=0.000）.流式细胞术检测发现,实验组处于G1期的细胞数为（83.30±1.26）％,对照组为（47.10±0.93）％；实验组S期细胞数量显著减少,为（12.63±0.92）％,对照组为（36.25±1.21）％；实验组G2期细胞数量显著减少,为（4.07±1.40）％,对照组为（16.65±1.53）％,两组间G1、S、G2期细胞比例的差异均有统计学意义（t=56.624、-38.130、-14.860,均P=0.000）.实验组的细胞凋亡率为（15.18±1.22）％,对照组为（2.20±0.15）％,二者间差异有统计学意义（t=25.742,P=0.000）.Western blot 检测结果示,实验组cyclin D1的表达量明显降低,而caspase-3的表达量则明显增高.ELISA法检测结果示,实验组RPE细胞的VEGF分泌量为（1314.49±147.23） ng/L,比对照组的（3251.27± 113.87） ng/L降低了59.6％,差异有统计学意义（t=-31.217,P=0.000）.结论 体外培养的RPE细胞敲减ILK后导致细胞增生活力下降,凋亡增加,且RPE细胞分泌VEGF的功能受到抑制,有望为PVR的靶向防治提供理论基础. 展开更多

关键词 整合素连接激酶 视网膜色素上皮细胞 小干扰RNA 增生性玻璃体视网膜病变

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白细胞介素-1受体拮抗剂对遗传性视网膜变性视细胞凋亡的影响 被引量：2

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作者 李爱军 房军 +3 位作者 朱秀安 于文贞 狄春辉 杨丽萍 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期23-27,共5页

背景遗传性视网膜变性是主要致盲性眼病之一，包括一系列以慢性进行性视网膜变性为病理特征的异常；白细胞介素-1（IL-1）参与变性与凋亡过程的调节，而白细胞介素-1受体拮抗剂（IL-1ra）对细胞凋亡的影响了解较少，IL-1ra是否能阻止视... 背景遗传性视网膜变性是主要致盲性眼病之一，包括一系列以慢性进行性视网膜变性为病理特征的异常；白细胞介素-1（IL-1）参与变性与凋亡过程的调节，而白细胞介素-1受体拮抗剂（IL-1ra）对细胞凋亡的影响了解较少，IL-1ra是否能阻止视网膜变性值得研究。目的研究IL-1ra对自发性遗传性视网膜变性大鼠视细胞凋亡的影响。方法选择SPF级出生后9、15、16、25、30、35、40、50、60d的RCS大鼠各9只9只眼制备视网膜切片，采用TUNEL凋亡检测试剂盒检测不同年龄大鼠视网膜凋亡细胞。选择出生后15d的RCS大鼠9只，右眼玻璃体腔注射质量浓度1．8g／LIL-1ra 1μl，左眼玻璃体腔注入PBS 1μl作为对照，分别待大鼠20日龄、25日龄时各重复注射药物1次，30日龄时处死实验大鼠并制备视网膜切片，采用TUNEL凋亡检测试剂盒检测及分析视网膜细胞凋亡情况。采用单因素方差分析比较不同鼠龄视网膜中阳性细胞核面积百分率的差异，采用配对t检验比较大鼠IL-1ra注射组与PBS注射组视网膜各层厚度的差异。结果RCS大鼠视网膜视细胞自出生后第25天出现凋亡，第30～35天达高峰，不同鼠龄间大鼠视网膜TUNEL阳性视细胞核面积百分率的差异有统计学意义（F=28．020，P〈0．01）。TUNEL凋亡图像分析结果显示，30日龄大鼠IL—lra注射眼视网膜TUNEL阳性染色弱于PBS注射眼，且阳性染色细胞数少于PBS注射眼；IL-1ra注射眼大鼠视网膜TUNEL阳性视细胞核总面积及相对面积均明显低于PBS注射眼，差异均有统计学意义[总面积：（223．052±153．092）μm2 VS．（1235．050±359．767）μm2，t=4．370，P〈0．01；相对面积：（2．206±1．531）％VS．（7．269±1．624）％，t=3．250，P〈O．01]。IL-1ra注射组和PBS注射组视锥与视杆细胞层厚度分别为（15．324±9．035）μm和（49．566±4．605）μm，差异有统计学意义（t=22．674，P〈0．01），但2个组间外核层（即由视锥细胞与视杆细胞的细胞体和细胞核组成）厚度比较差异无统计学意义（t=0．268，P〉0．05）。结论遗传性视网膜变性眼中IL-1对视网膜凋亡发挥一定的调控作用，IL-1ra对遗传性视网膜变性早期具有潜在的临床治疗价值。 展开更多

关键词 遗传性视网膜变性 白细胞介素 白细胞介素-1 受体拮抗剂 细胞凋亡

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玻璃体切除术治疗增殖型糖尿病性视网膜病变 被引量：5

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作者 董晓光 纪惠谦 +1 位作者 张元宏 于文贞 《眼科新进展》 CAS 2000年第2期140-141,共2页

目的　回顾性分析玻璃体切除术治疗增殖型糖尿病性视网膜病变 (proliferative diabetic retinopathy,PDR)的疗效。方法　对 34例 (40眼 ) PDR患者 (IV期 10眼 ,V期 14眼 ,VI期 16眼 )行常规扁平部三切口闭合式玻璃体切除术 ,同时根据病... 目的　回顾性分析玻璃体切除术治疗增殖型糖尿病性视网膜病变 (proliferative diabetic retinopathy,PDR)的疗效。方法　对 34例 (40眼 ) PDR患者 (IV期 10眼 ,V期 14眼 ,VI期 16眼 )行常规扁平部三切口闭合式玻璃体切除术 ,同时根据病情分别行晶状体超声粉碎、晶状体切除、视网膜复位、眼内激光、硅油注入等。结果　随访 3～ 36 mo(平均 18.5 mo) ,术后脱盲率 47.5 0 % ,脱残率 15 .0 0 % ;术后 16眼角膜上皮愈合迟缓 (40 .0 0 % ) ;5眼发生新生血管性青光眼 (12 .5 0 % ) ;视网膜复位率 6 5 .2 2 % .结论　 PDR合并严重玻璃体出血。牵引性视网膜脱离 ,应用玻璃体切除术可有效地清除玻璃体积血 ,缓解视网膜脱离。但因病情严重 ,手术难度大 ,术后视力恢复差 ,术后并发症多。 展开更多

关键词 糖尿病 视网膜病变 玻璃体切除术

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HSCs改善糖尿病小鼠血-视网膜屏障功能的研究 被引量：2

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作者 田蓓 黎晓新 +2 位作者 沈丽 董建强 于文贞 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2007年第4期261-264,共4页

目的探讨自体造血干细胞动员是否可使成体造血干细胞(HSCs)环境诱导分化,修复受损的视网膜微血管内皮细胞,使血-视网膜屏障得到功能性重建。方法糖尿病小鼠和正常小鼠各分为干细胞动员组和生理盐水对照组。流式细胞术以CD34-/low和sca1... 目的探讨自体造血干细胞动员是否可使成体造血干细胞(HSCs)环境诱导分化,修复受损的视网膜微血管内皮细胞,使血-视网膜屏障得到功能性重建。方法糖尿病小鼠和正常小鼠各分为干细胞动员组和生理盐水对照组。流式细胞术以CD34-/low和sca1+为标记鉴定外周血HSCs。小鼠视网膜病理切片行苏木精-伊红染色观察和VEGF免疫组织化学分析,伊文思蓝定量检测血-视网膜屏障的破坏程度。结果自体干细胞动员使糖尿病小鼠视网膜的VEGF表达量明显下降。糖尿病小鼠经干细胞动员后清蛋白的渗出量明显下降(P=0.033)。结论自体HSCs动员可以通过外周血干细胞倍增使血-视网膜屏障得到一定程度的功能性修复。 展开更多

关键词 成体造血干细胞 糖尿病视网膜病变 血-视网膜屏障

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视网膜新生血管形成中Cathepsin B的变化 被引量：3

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作者 周国宏 于文贞 黎晓新 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2007年第10期745-748,共4页

目的通过观察Cathepsin B的变化,探讨视网膜新生血管的发病机制。方法取C57BL/6J7d龄小鼠30只,随机分为对照组和实验组,实验组在缺氧环境中建立视网膜新生血管动物模型。采用苏木精-伊红染色、视网膜ADP酶染色铺片及免疫组织化学法进行... 目的通过观察Cathepsin B的变化,探讨视网膜新生血管的发病机制。方法取C57BL/6J7d龄小鼠30只,随机分为对照组和实验组,实验组在缺氧环境中建立视网膜新生血管动物模型。采用苏木精-伊红染色、视网膜ADP酶染色铺片及免疫组织化学法进行检测,同时测定眼组织Cathepsin B活性。结果组织病理学见突破内膜新生血管内皮细胞核数,无血管区面积及无血管区面积/视网膜面积,实验组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);对照组与实验组Cathepsin B平均光密度、Cathepsin B活性比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论C57BL/6J构建小鼠视网膜新生血管动物模型后,小鼠视网膜组织Cathepsin B表达增加、活性增强,CathepsinB可能是视网膜新生血管产生的一个重要因素。 展开更多

关键词 组织蛋白酶B 视网膜新生血管 C57BL/6J鼠

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重组腺伴随病毒载体介导Kringle5基因对SD大鼠视网膜神经细胞及血管内皮细胞的影响 被引量：1

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作者 宋哲 黎晓新 +2 位作者 于文贞 董建强 闫征 《国际眼科杂志》 CAS 2007年第2期380-382,共3页

目的:研究腺伴随病毒载体介导Kringle5基因对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUC)及视网膜神经细胞影响作用。方法:亚克隆构建pSNAV-Kringle5-gfp载体,腺伴随病毒包装形成rAAV-Kringle5-gfp;HUC培养及SD大鼠... 目的:研究腺伴随病毒载体介导Kringle5基因对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUC)及视网膜神经细胞影响作用。方法:亚克隆构建pSNAV-Kringle5-gfp载体,腺伴随病毒包装形成rAAV-Kringle5-gfp;HUC培养及SD大鼠视网膜神经细胞培养;按设计分为试验组、阴性对照组和空白对照组;聚合酶链反应(PCR),MTT法对各组进行细胞活力测定;荧光显微镜照相。结果:腺伴随病毒载体介导Kringle5基因产生Kringle5物质对HUC有抑制作用,实验组与对照组比较P<0.01,实验组与空白对照组比较P>0.05;腺伴随病毒载体介导Kringle5基因产生Kringle5物质对SD大鼠视网膜神经细胞实验组和空白对照组没有影响,实验组与对照组及实验组与空白对照组比较P>0.05。结论:腺伴随病毒载体介导Kringle5基因能够对新生血管有抑制作用而对视网膜神经细胞无不良影响作用。 展开更多

关键词 腺伴随病毒载体 血管抑制素Kringle5 血管内皮细胞 SD大鼠视网膜神经细胞

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