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我国部分地区A2dB1型传染性法氏囊病病毒新型变异株的鉴定及序列分析
1
作者 张文英 于航博 +15 位作者 姜楠 王国栋 牛鑫鑫 黄萌萌 张玉龙 韩金泽 许萌萌 刘长军 王素艳 李凯 高立 崔红玉 张艳萍 陈运通 高玉龙 祁小乐 《中国家禽》 北大核心 2024年第9期194-200,共7页
为持续了解传染性法氏囊病病毒新型变异株(Novel variant infectious bursal disease virus,nVarIBDV)在我国流行情况,研究收集2021—2022年6个主要养禽地区疑似传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)鸡病料,采用RT-PCR进行检... 为持续了解传染性法氏囊病病毒新型变异株(Novel variant infectious bursal disease virus,nVarIBDV)在我国流行情况,研究收集2021—2022年6个主要养禽地区疑似传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)鸡病料,采用RT-PCR进行检测,并对11株IBDV代表毒株的基因组双节段代表区段VP2-HVR和VP1-B-marker进行基因测序及序列分析。结果显示:所检测病料的IBDV阳性率为20.65%(19/92),其中11株IBDV代表毒株均为A2dB1型nVarIBDV。研究表明,nVarIBDV在我国主要养禽地区仍持续流行,而且出现了值得注意的新的突变位点,有必要进行持续的IBDV流行病学监测。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 新型变异株 A2dB1型 流行病学
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鸡pro-IL-1β表达、多克隆抗体制备与初步应用
2
作者 许萌萌 黄萌萌 +12 位作者 牛鑫鑫 王国栋 于航博 张玉龙 韩京哲 韩金泽 刘润杭 吴子文 于晓雪 王笑梅 高玉龙 李留安 祁小乐 《中国家禽》 北大核心 2024年第10期89-96,共8页
为研究禽类疫病病原触发炎症的分子机制,试验克隆和分析鸡源白细胞介素-1β前体(Interleukin-1β precursors,pro-IL-1β)基因,原核表达和纯化pro-IL-1β蛋白,用纯化的pro-IL-1β蛋白免疫小鼠制备pro-IL-1β多克隆抗体,对该抗体进行ELIS... 为研究禽类疫病病原触发炎症的分子机制,试验克隆和分析鸡源白细胞介素-1β前体(Interleukin-1β precursors,pro-IL-1β)基因,原核表达和纯化pro-IL-1β蛋白,用纯化的pro-IL-1β蛋白免疫小鼠制备pro-IL-1β多克隆抗体,对该抗体进行ELISA效价检测和鉴定,并初步测试了该抗体在间接免疫荧光试验和Western blot试验中的应用效果。结果显示:重组蛋白pro-IL-1β成功表达,分子量约37 ku,能与His标签抗体发生特异性结合反应;获得了ELISA效价高于1∶32 000的鼠抗pro-IL-1β多克隆抗体,该抗体可通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到pro-IL-1β真核表达蛋白,也可通过Western blot试验检测到pro-IL-1β原核表达蛋白和真核表达蛋白,还可通过Western blot和IFA检测到传染性法氏囊病病毒(IBDV)诱发的巨噬细胞HD11内源性pro-IL-1β蛋白的表达。研究表明,试验成功制备鸡pro-IL-1β多克隆抗体,为进一步研究禽病病原诱发炎症的分子机制提供了重要工具。 展开更多
关键词 鸡 pro-IL-1β 克隆 表达 多克隆抗体 炎症
原文传递
鸡NLRP3蛋白表达、多克隆抗体制备与初步应用
3
作者 许萌萌 黄萌萌 +12 位作者 王国栋 于航博 韩京哲 牛鑫鑫 张玉龙 韩金泽 刘润杭 吴子文 于晓雪 王笑梅 高玉龙 李留安 祁小乐 《中国动物检疫》 CAS 2024年第7期96-103,共8页
为探究禽病病原触发炎症的分子机制,通过克隆和分析鸡源NLRP3基因,原核表达和纯化了NLRP3蛋白,随后用纯化的NLRP3蛋白免疫小鼠制备了NLRP3多克隆抗体,对该抗体进行了ELISA效价检测,并初步测试了该抗体在间接免疫荧光试验(IFA)和Western ... 为探究禽病病原触发炎症的分子机制,通过克隆和分析鸡源NLRP3基因,原核表达和纯化了NLRP3蛋白,随后用纯化的NLRP3蛋白免疫小鼠制备了NLRP3多克隆抗体,对该抗体进行了ELISA效价检测,并初步测试了该抗体在间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot试验中的应用效果。结果显示:成功表达重组蛋白NLRP3,其相对分子质量约87 kDa,能与His标签抗体发生特异性结合反应;成功制备鸡NLRP3蛋白多克隆抗体,其ELISA效价高达1:32 000;Western blot和IFA检测中,NLRP3多克隆抗体可与NLRP3原核表达蛋白和真核表达蛋白发生特异性反应,还可检测到由IBDV触发的以及LPS刺激产生的巨噬细胞HD11内源性NLRP3蛋白的上调表达。结果表明,制备的鸡NLRP3蛋白多克隆抗体免疫原性较好、效价较高。本试验为进一步研究禽病病原诱发炎症的分子机制提供了重要工具。 展开更多
关键词 NLRP3 原核表达 多克隆抗体 炎症检测
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鸡传染性法氏囊病病毒VP5的原核表达、多抗制备及初步应用
4
作者 韩金泽 牛鑫鑫 +12 位作者 王国栋 葛成菲 张玉龙 黄萌萌 许萌萌 于航博 刘润杭 韩京哲 吴子文 于晓雪 高玉龙 李留安 祁小乐 《中国动物检疫》 CAS 2024年第2期92-98,共7页
传染性法氏囊病(infectious bursal disease virus,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种主要危害雏鸡的急性传染病。在IBDV编码的5个蛋白中,VP5是IBDV唯一可以缺失基因的蛋白。本研究克隆了IBD... 传染性法氏囊病(infectious bursal disease virus,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种主要危害雏鸡的急性传染病。在IBDV编码的5个蛋白中,VP5是IBDV唯一可以缺失基因的蛋白。本研究克隆了IBDV优势流行毒株的VP5蛋白编码基因,利用原核表达系统表达了VP5蛋白,通过免疫BALB/c小鼠制备VP5多抗,并对多抗进行了鉴定和检测不同IBDV毒株的应用。结果显示,IBDV优势流行毒株的VP5蛋白实现了可溶性表达,分子质量约为17 kDa;制备的VP5多抗特异性良好,ELISA效价可达1:64000;VP5多抗可通过IFA和Western Blot检测识别IBDV rHLJ0504-HT株,不识别VP5基因缺失株。结果表明:试验成功表达了IBDV优势流行毒株的VP5蛋白,并制备了VP5多抗;VP5多抗可对IBDV及其VP5编码基因缺失毒株进行鉴别检测。本研究对于IBDV检测方法的建立以及VP5编码基因功能的进一步研究提供了物质基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 VP5 表达 多抗 应用
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