目的建立生鲜肉中猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分的DNA测序鉴别方法,并对采集自北京各地区生鲜肉品进行检测验证。方法合成动物线粒体上12S rRNA、cytochrome b、cytochrome c oxidase基因引物,建立猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分的DNA测序鉴...目的建立生鲜肉中猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分的DNA测序鉴别方法,并对采集自北京各地区生鲜肉品进行检测验证。方法合成动物线粒体上12S rRNA、cytochrome b、cytochrome c oxidase基因引物,建立猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分的DNA测序鉴别方法,并对50份猪、牛、羊、鸡、鸭肉品进行检测。结果使用线粒体上12S rRNA、cytochrome b、cytochrome c oxidase基因引物对猪、牛、羊、鸡、鸭肉品进行扩增,分别获得456、400和710 bp大小的DNA片段。只有12S rRNA基因引物均可对此5种动物源性成分扩增且效果良好。扩增产物进行序列测定。根据序列构建的系统进化树发现,此方法可有效区分样品中猪、牛、羊、鸡、鸭源性成分。结论此方法快速、简便,可准确检测50种生鲜肉样品中的动物源性成分,作为肉类鉴别的新方法。展开更多
目的优化一种从大体积肉类中提取DNA的方法。方法从大组织肉上多点取样,用组织粉碎机打碎,称取10 g肉加入90 m L PBS缓冲液和450μL蛋白酶K,60℃消化至澄清后,混匀,取200μL消化液用试剂盒进行DNA提取;再与常规试剂盒方法提取的DNA在同...目的优化一种从大体积肉类中提取DNA的方法。方法从大组织肉上多点取样,用组织粉碎机打碎,称取10 g肉加入90 m L PBS缓冲液和450μL蛋白酶K,60℃消化至澄清后,混匀,取200μL消化液用试剂盒进行DNA提取;再与常规试剂盒方法提取的DNA在同条件进行实时荧光PCR及琼脂糖凝胶电泳验证。结果 2种方法提取DNA的Ct值差异在0.5个循环以内,无显著性差异(P>0.05);电泳结果显示,2种方法所扩增的为同一产物。结论该方法取样具有代表性,可适用于大体积肉类掺假检测或动物源性成分检测中的DNA提取。展开更多
文摘目的优化一种从大体积肉类中提取DNA的方法。方法从大组织肉上多点取样,用组织粉碎机打碎,称取10 g肉加入90 m L PBS缓冲液和450μL蛋白酶K,60℃消化至澄清后,混匀,取200μL消化液用试剂盒进行DNA提取;再与常规试剂盒方法提取的DNA在同条件进行实时荧光PCR及琼脂糖凝胶电泳验证。结果 2种方法提取DNA的Ct值差异在0.5个循环以内,无显著性差异(P>0.05);电泳结果显示,2种方法所扩增的为同一产物。结论该方法取样具有代表性,可适用于大体积肉类掺假检测或动物源性成分检测中的DNA提取。
