卵巢功能减退患者卵泡液外泌体差异表达miRNA筛选及生物学功能分析

1

作者 沈开元 曲晓力 +4 位作者 代小丽 黄萍 邹乾兴 梁媛媛 罗平 《现代检验医学杂志》 CAS 2023年第5期17-22,共6页

目的 筛选卵巢功能减退(diminished ovarian reserve,DOR)患者卵泡液外泌体差异表达微小核糖核酸(micro RNA,mi RNA),探索其与DOR相关的潜在分子机制。方法 收集2021年12月~2022年3月于柳州市人民医院生殖医学科辅助生殖助孕18例患者的... 目的 筛选卵巢功能减退(diminished ovarian reserve,DOR)患者卵泡液外泌体差异表达微小核糖核酸(micro RNA,mi RNA),探索其与DOR相关的潜在分子机制。方法 收集2021年12月~2022年3月于柳州市人民医院生殖医学科辅助生殖助孕18例患者的卵泡液为研究样本,根据卵巢功能评估结果分为卵巢功能正常(Normal)组和卵巢功能减退(DOR)组。miRNA PCR阵列芯片法检测两组卵泡液外泌体miRNA的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)验证芯片结果,最后通过生物信息学分析差异表达miRNA的靶基因及其富集的相关生物学功能和分子通路。结果 DOR组筛选出5条差异表达miRNA:let-7d-3p,let-7e-5p,miR-25-3p和miR-30c-5p表达下调,miR-483-3p表达上调;qRT-PCR验证结果显示与Normal组比较,DOR组let-7d-3p,let-7e-5p,miR-25-3p和miR-30c-5p表达降低,miR-483-3p的表达升高,差异具有统计学意义(t=3.147,4.405,3.95,3.147,-3.198,均P<0.05);差异表达miRNA的靶基因主要富集于p53信号通路和FoxO信号通路,靶基因CDKN1A, RRM2, CCND1, SESN3, MDM4, BCL2L11,SMAD4, IGF1及IGF1R参与p53信号通路和FoxO信号通路,靶基因METTL3,METTL6及METTL8参与RNA m6A甲基化。结论 DOR患者卵泡液外泌体中的差异表达miRNA参与p53和FoxO信号通路及RNA m6A甲基化的调控,是DOR发生机制和诊疗的潜在标靶。 展开更多

关键词 PCR阵列芯片法 卵巢功能减退 卵泡液外泌体 微小核糖核酸

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某染料厂地块1,2,4-三氯苯污染分布特征及迁移规律

2

作者 王硕 乔鹏炜 +4 位作者 代小丽 李佳斌 魏燕 魏文侠 李培中 《环境工程技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期501-509,共9页

以北京某染料厂污染地块为例,对5种氯苯类(氯苯、1,2-二氯苯、1,4-二氯苯、1,2,3-三氯苯、1,2,4-三氯苯)挥发性有机污染物在土壤及地下水中的浓度数据进行统计分析。选取土壤及地下水样品中检出浓度、超标倍数较高的1,2,4-三氯苯,分析... 以北京某染料厂污染地块为例,对5种氯苯类(氯苯、1,2-二氯苯、1,4-二氯苯、1,2,3-三氯苯、1,2,4-三氯苯)挥发性有机污染物在土壤及地下水中的浓度数据进行统计分析。选取土壤及地下水样品中检出浓度、超标倍数较高的1,2,4-三氯苯,分析其在土壤中垂向分布特征及地下水中水平分布特征,利用GMS软件中MT3D模拟1,2,4-三氯苯在地下水中溶质迁移规律。结果表明:土壤样品中5种氯苯类有机污染物最大检出浓度均超过相应筛选值;地下水样品中氯苯、1,2-二氯苯最大检出浓度均未超过相应筛选值,1,4-二氯苯、1,2,3-三氯苯、1,2,4-三氯苯最大检出浓度均超过相应筛选值。土壤中高浓度1,2,4-三氯苯污染物主要集中在0~10 m深度范围内,地下水中1,2,4-三氯苯污染物浓度西北部明显高于东南部。地块内北侧地下水位线有轻微北移现象,各监测井地下水位处于缓慢下降趋势。地块内1,2,4-三氯苯在540 d时运移到地块南侧边界,运移距离为96.2 m。 展开更多

关键词 染料厂 土壤 地下水 1 2 4-三氯苯 分布特征 迁移

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重质油炼化污水生化处理出水的污染特征分析 被引量：9

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作者 陈宇 吴青 +2 位作者 代小丽 王旻烜 郭绍辉 《石油化工高等学校学报》 CAS 2015年第2期7-12,共6页

将傅里叶变换离子回旋共振质谱(FT-ICR MS)与气相色谱-质谱(GC-MS)结合,实现了对有机污染物微观组成的全分析,在此基础上形成了炼化污水水质剖析方法。对重质油炼化污水系统生化工艺出水进行污染物组成分析发现,其有机负荷基本由难降解... 将傅里叶变换离子回旋共振质谱(FT-ICR MS)与气相色谱-质谱(GC-MS)结合,实现了对有机污染物微观组成的全分析,在此基础上形成了炼化污水水质剖析方法。对重质油炼化污水系统生化工艺出水进行污染物组成分析发现,其有机负荷基本由难降解的大分子极性有机污染物构成,不可生物降解的非极性大分子烷烃类也有一定贡献。极性有机污染物总数量达到376种,Ox、NxOx与SxOx是主要类型;推测为有机酸类、酯类与杂环化合物,分子结构复杂且不饱和,普遍带有芳香环、稠环以及杂环。含N杂环化合物还与硝酸盐氮一起构成了高浓度的总氮。根据生化工艺出水的污染特性,优化生化工艺的COD降解与脱氮效能,并利用臭氧催化氧化技术深度处理,将有助于实现全面达标排放。 展开更多

关键词 重质油 炼化污水 生化工艺 污染物组成 傅里叶变换离子回旋共振质谱 气相色谱-质谱

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成熟前后水牛卵母细胞蛋白质组的初步研究 被引量：2

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作者 陈凌声 代小丽 +6 位作者 徐永茹 罗婵 陆凤花 蒋建荣 石德顺 徐平 李湘萍 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期2003-2011,共9页

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳联合反相液相色谱-串联质谱(RP-LC-MS/MS)蛋白质组学技术,研究GV期和MII期水牛卵母细胞蛋白质组,以期为揭示水牛卵母细胞体外成熟分子机理、筛选与卵母细胞成熟质量相关蛋白质奠定理论基础。从GV期和MII期水牛卵... 应用聚丙烯酰胺凝胶电泳联合反相液相色谱-串联质谱(RP-LC-MS/MS)蛋白质组学技术,研究GV期和MII期水牛卵母细胞蛋白质组,以期为揭示水牛卵母细胞体外成熟分子机理、筛选与卵母细胞成熟质量相关蛋白质奠定理论基础。从GV期和MII期水牛卵母细胞中分别鉴定到647和570种蛋白质(FDR<1%)。其中,鉴定相同蛋白质414种;GV期和MII期卵母细胞特有鉴定蛋白质分别为233种和156种。通过谱图计数法获得鉴定蛋白质的半定量信息,从GV期和MII期水牛卵母细胞中筛选到9种高丰度蛋白质。其中8种为相同蛋白质,包括穹窿体蛋白、谷胱苷肽S-转移酶M3、蛋白精氨酸脱亚氨酶6、过氧化物氧化还原酶2、二磷核苷酸激酶B、动力蛋白轻链1、醛糖还原酶、类甘油醛-3-三磷酸脱氢酶同源物2等。热激蛋白90α和谷胱甘肽S-转移酶P分别为GV期和MII期水牛卵母细胞特有的高丰度蛋白质,这些蛋白质可能与水牛卵母细胞成熟过程密切相关。GO(Gene Ontology)和KEGG分析显示,鉴定相同蛋白质主要集中在丙酮酸盐代谢、三羧酸循环(TCA)、糖酵解/糖原生成、磷酸戊糖途径等能量代谢通路,提示水牛卵母细胞成熟过程中可能需要维持高的能量代谢水平,以保证卵母细胞减数分裂的完成。GV期细胞特有鉴定蛋白质主要集中在氧化磷酸化、核糖体以及蛋白酶体等KEGG通路,表明GV期卵母细胞可能具有高的氧化磷酸化和蛋白合成水平,蛋白酶体在推动水牛卵母细胞成熟进程中可能发挥重要作用。MII期细胞特有鉴定蛋白质主要集中在DNA复制和氨基糖、核苷糖代谢等KEGG通路,提示水牛卵母细胞可能在为后续的受精过程和早期卵裂进行遗传物质的准备。综上表明,成熟前后水牛卵母细胞蛋白质表达模式,为进一步深入了解水牛卵母细胞成熟分子机理奠定理论基础。 展开更多

关键词 水牛 体外成熟 卵母细胞 蛋白质组

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重组杆状病毒载体在基因治疗中的应用 被引量：2

5

作者 廖致红 代小丽 +4 位作者 吴春凤 刘志华 李丽敏 徐鹏(综述) 沈开元(审校) 《国际检验医学杂志》 CAS 2020年第14期1751-1754,共4页

重组杆状病毒作为安全、可靠的基因治疗载体,在神经性疾病、心血管疾病以及恶性肿瘤的基因治疗中具有重要的应用价值。随着分子生物学技术日趋成熟,杆状病毒表达系统的研究使得该载体能够成功规避机体血液中补体系统的清除。另外,具有... 重组杆状病毒作为安全、可靠的基因治疗载体,在神经性疾病、心血管疾病以及恶性肿瘤的基因治疗中具有重要的应用价值。随着分子生物学技术日趋成熟,杆状病毒表达系统的研究使得该载体能够成功规避机体血液中补体系统的清除。另外,具有组织特异性的启动子也为实现各类重组病毒载体的靶向治疗发挥了重要的作用。该文对重组杆状病毒基因治疗载体的研究进行总结和阐述,以期对构建p53基因重组杆状病毒基因治疗载体提供文献依据,实现更安全、可靠、精准的基因治疗策略。 展开更多

关键词 杆状病毒 基因治疗 载体

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卵巢储备功能减退患者卵泡液外泌体对小鼠卵母细胞体外成熟的影响 被引量：1

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作者 沈开元 杨冠群 +6 位作者 罗平 代小丽 黄萍 梁媛媛 李顺 陈立群 曲晓力 《生殖医学杂志》 CAS 2022年第10期1422-1429,共8页

目的探讨卵巢储备功能减退(DOR)患者卵泡液外泌体对小鼠卵母细胞体外成熟的影响,以期为女性因DOR导致的生育功能降低和不孕症的发生提供新的科学实验数据。方法选取SPF级4~6周龄C57BL/6J未孕雌性小鼠,收集未成熟卵母细胞并进行体外成熟... 目的探讨卵巢储备功能减退(DOR)患者卵泡液外泌体对小鼠卵母细胞体外成熟的影响,以期为女性因DOR导致的生育功能降低和不孕症的发生提供新的科学实验数据。方法选取SPF级4~6周龄C57BL/6J未孕雌性小鼠,收集未成熟卵母细胞并进行体外成熟培养;同时收集DOR患者卵泡液,并提取外泌体。利用Dio荧光标记外泌体后与小鼠未成熟卵丘-卵母细胞复合物(COCs)共孵育培养,观察外泌体摄入情况;通过添加不同浓度0、50、100和150μg/ml外泌体处理小鼠未成熟COCs 16 h观察卵丘扩展和第一极体排出情况,分析其对卵母细胞成熟的影响并筛选出最佳处理浓度;设置分组为体内成熟组(control)、外泌体添加组(exo+)和未添加组(exo-),各组成熟后的COCs利用qPCR检测卵丘扩展相关基因Has2、Tnfaip6和Ptgs2以及凋亡相关基因Bax、Bcl2的mRNA相对表达水平,分析各组间的差异。结果(1)Dio标记的外泌体与小鼠COCs共孵育,卵丘颗粒细胞上能观察到明显的Dio荧光信号,证实COCs能够摄入外泌体;(2)不同浓度外泌体处理组的GV期卵母细胞百分比均显著高于0μg/ml组(P<0.05),而MⅡ期卵母细胞百分比均显著低于0μg/ml组(P<0.05)。使用150μg/ml作为后续实验工作浓度;(3)qPCR的结果显示,小鼠COCs中卵丘扩展相关基因Has2的mRNA表达水平在体内成熟组及体外成熟培养组各组间的差异无统计学意义(P>0.05),exo+组和exo-组的Tnfaip6、Bcl2和Bax mRNA表达水平均显著低于control组(P<0.05或P<0.01),exo+组Ptgs2的mRNA表达水平显著低于control组(P<0.05);此外,exo+组Tnfaip6、Ptgs2和Bcl2的mRNA表达水平均显著低于exo-组(P<0.05或P<0.01)。结论DOR患者卵泡液外泌体能够抑制小鼠卵母细胞体外成熟过程中卵丘扩展和减数分裂恢复,并且显著抑制了卵丘扩展相关基因Ptgs2和Tnfaip6以及细胞凋亡抑制基因Bcl2的表达。 展开更多

关键词 卵巢储备功能减退 外泌体 卵丘-卵母细胞复合体 体外成熟

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1,2,3-三氯丙烷污染地下水修复技术的研究进展

7

作者 代小丽 王硕 +1 位作者 李佳斌 魏燕 《应用化工》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1213-1217,1224,共6页

综述了1,2,3-三氯丙烷(TCP)的理化性质、毒性、在环境中的迁移特性、赋存状态及降解机制,重点介绍了TCP污染地下水的物理修复技术、化学修复技术和生物修复技术,并指出高效TCP降解菌的筛选、高活性TCP降解酶制剂的制备及零价金属与生物... 综述了1,2,3-三氯丙烷(TCP)的理化性质、毒性、在环境中的迁移特性、赋存状态及降解机制,重点介绍了TCP污染地下水的物理修复技术、化学修复技术和生物修复技术,并指出高效TCP降解菌的筛选、高活性TCP降解酶制剂的制备及零价金属与生物刺激联合修复是TCP污染地下水修复技术的研究方向。 展开更多

关键词 1 2 3-三氯丙烷 污染地下水 迁移特性 赋存状态 降解机制 修复技术

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ssc-miR-148a启动子克隆及其特征分析

8

作者 王萍 郝文艳 +6 位作者 曹丽华 沈开元 代小丽 李海艳 梁贤威 石德顺 李湘萍 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1969-1976,共8页

为研究猪miR-148a(ssc-miR-148a)的转录调控机制,对其启动子进行了克隆及分析。本试验首先设计特异性PCR扩增引物,分别得到ssc-miR-148a前体上游3个片段,并将其连接到荧光素酶报告载体pGL3-Basic上。通过生物信息学方法,在线分析ssc-miR... 为研究猪miR-148a(ssc-miR-148a)的转录调控机制,对其启动子进行了克隆及分析。本试验首先设计特异性PCR扩增引物,分别得到ssc-miR-148a前体上游3个片段,并将其连接到荧光素酶报告载体pGL3-Basic上。通过生物信息学方法,在线分析ssc-miR-148a启动子大概区域、甲基化部位和转录因子结合部位。将重组报告质粒转染293T细胞,分析启动子活性。采用不同浓度碱性成纤维生长因子(bFGF)处理猪成纤维细胞和转染有重组报告质粒的猪成纤维细胞,检测ssc-miR-148a和DNA甲基化转移酶1(DNMT1)的表达,及其对启动子活性的影响。结果显示,克隆得到的ssc-miR-148a启动子区2 043bp片段具有启动子活性,该序列存在5个CpG岛、Sp1及AP2等转录因子结合位点。0、5和10ng·mL-1浓度bFGF处理猪成纤维细胞和转染重组报告质粒的猪成纤维细胞后,ssc-miR-148a表达均显著下降(P<0.05),DNMT1 mRNA显著增加(P<0.05)。启动子活性均显著下降(P<0.05),5和10ng·mL-1浓度间无显著差异(P>0.05)。结果表明,ssc-miR-148a启动子位于前体上游2 043bp片段内,启动子区域有转录因子SP1结合位点,其表达受bFGF的调控。 展开更多

关键词 ssc-miR-148a 启动子 克隆 BFGF DNMT1

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H3K4和H3K9三甲基化在猪体外成熟卵母细胞和克隆胚胎中的表达分析

9

作者 沈开元 代小丽 +3 位作者 杨婷 佘春 石德顺 李湘萍 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1-6,共6页

该研究主要运用单细胞免疫荧光技术分析猪卵母细胞和克隆胚胎发育过程中,H3K4和H3K9三甲基化(H3K4me3,H3K9me3)的表达情况.收集体外成熟0h,6h,12h,24h,30h,36h,42h的猪卵母细胞;同时通过体细胞核移植操作获得一细胞、四细胞、桑葚胚和... 该研究主要运用单细胞免疫荧光技术分析猪卵母细胞和克隆胚胎发育过程中,H3K4和H3K9三甲基化(H3K4me3,H3K9me3)的表达情况.收集体外成熟0h,6h,12h,24h,30h,36h,42h的猪卵母细胞;同时通过体细胞核移植操作获得一细胞、四细胞、桑葚胚和囊胚期克隆胚胎,经过免疫荧光染色,在激光共聚焦显微镜下观察H3K4me3和H3K9me3修饰在卵母细胞和胚胎中的变化情况.免疫荧光结果显示,在不同减数分裂阶段的猪卵母细胞内均能观察到H3K4me3的表达,并且呈现出逐渐下降的趋势;在生发泡期(GV),生发泡晚期(L-GV)和生发泡破裂(GVBD)阶段的卵母细胞中能发现明显的H3K9me3表达,随着减数分裂的进行,H3K9me3表达消失,在第一次减数分裂中期前阶段(Pre-MI)到第二次减数分裂中期(MⅡ)阶段卵母细胞中未发现H3K9me3荧光信号.H3K4me3和H3K9me3在不同发育阶段的猪克隆胚胎中都有表达,其中H3K4me3在不同阶段胚胎中荧光信号强度相近,H3K9me3在四细胞胚胎中荧光强度降低,在桑葚胚和囊胚中荧光强度出现升高的趋势.以上结果说明,H3K4me3参与调控猪卵母细胞体外成熟的整个过程,H3K4me3和H3K9me3在猪体细胞核移植胚胎早期发育过程中可能具有调控作用. 展开更多

关键词 H3K4三甲基化 H3K9三甲基化 猪 卵母细胞 体细胞核移植胚胎

原文传递

论《归家》中的陌生化效果

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作者 代小丽 《河南科技学院学报（社会科学版）》 2015年第11期49-51,共3页

《归家》向读者展现了一个传统被彻底颠覆的世界。传统的社会道德秩序、婚姻秩序和伦理规范均被打破,一切都陷入荒诞和混乱之中。文章通过分析陌生化在《归家》中的应用及产生的戏剧效果,意在表明陌生化是《归家》呈现荒诞的主要手段之... 《归家》向读者展现了一个传统被彻底颠覆的世界。传统的社会道德秩序、婚姻秩序和伦理规范均被打破,一切都陷入荒诞和混乱之中。文章通过分析陌生化在《归家》中的应用及产生的戏剧效果,意在表明陌生化是《归家》呈现荒诞的主要手段之一,进而增进对作品创作手法和艺术价值的认识和了解。 展开更多

关键词 《归家》 陌生化 家 爱

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对传统文化的坚守与顺从:《廊桥遗梦》的另一种阐释

11

作者 代小丽 《河南科技学院学报（社会科学版）》 2014年第5期57-59,共3页

一千个读者,就有一千个哈姆雷特。对于《廊桥遗梦》里讲述的故事,不同的人会有不同的理解。从另一个视角来解读这个故事,它展现了美国人对婚姻、文化和传统的另一种态度:对婚姻的坚守,对文化、宗教教义的顺从,对传统文化的传承。

关键词 婚姻坚守 圣经 基督教 文化传承

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“讲好中国故事”语境下医护类高职院校公共英语教学改革与创新实践探究

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作者 代小丽 《海外英语》 2023年第14期199-201,共3页

通过英语教学帮助学生掌握必需的英语知识和用英语讲述中国故事的能力,把他们培养成为讲好中国故事的生力军,是英语教学立德树人的重要使命。深其深、浅其浅、分层设定目标,以产出导向理论为指导、以交际教学促进能力提升,基于需求重构... 通过英语教学帮助学生掌握必需的英语知识和用英语讲述中国故事的能力,把他们培养成为讲好中国故事的生力军,是英语教学立德树人的重要使命。深其深、浅其浅、分层设定目标,以产出导向理论为指导、以交际教学促进能力提升,基于需求重构教学内容、加强中国故事元素建设,大力促进医护类高职院校英语教学的育人成效。 展开更多

关键词 讲好中国故事 分层教学 产出导向法 中国文化元素

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茄根中总多酚含量的测定 被引量：3

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作者 李双双 李维双 +1 位作者 代小丽 周媛 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第30期16855-16857,共3页

采用改进的Folin-Ciocalteu比色法测定茄根中总多酚的含量。结果表明,对照品标准曲线在0.0096～0.0768mg线性关系良好。茄根的75%乙醇提取物中总多酚的平均含量为0.272%,RSD为0.98%;平均加标回收率为97.47%,RSD为3.64%。

关键词 茄根 总多酚 Folin-Ciocalteu比色法

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重金属离子与依诺沙星相互作用的荧光光谱法研究 被引量：1

14

作者 韩甜甜 凌晶 +2 位作者 代小丽 雷燕 李瑞萍 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期117-119,174,共4页

荧光分析法是利用物质的荧光性质对物质进行分析的方法,文章应用荧光法研究了不同温度下重金属离子Cu2+、Pb2+及Mn2+与喹诺酮类药物依诺沙星(ENX)的相互作用。结果表明:Cu2+、Pb2+及Mn2+对ENX内源荧光的猝灭机制属于形成复合物所引起的... 荧光分析法是利用物质的荧光性质对物质进行分析的方法,文章应用荧光法研究了不同温度下重金属离子Cu2+、Pb2+及Mn2+与喹诺酮类药物依诺沙星(ENX)的相互作用。结果表明:Cu2+、Pb2+及Mn2+对ENX内源荧光的猝灭机制属于形成复合物所引起的静态猝灭,利用Stern-Volmer关系式计算了ENX与重金属离子Cu2+、Pb2+及Mn2+之间的猝灭常数KSV及结合位点数,根据热力学参数(自由能变ΔG、焓变ΔH、熵变ΔS)确定了ENX与重金属离子之间的主要作用力类型为静电作用力。该研究为探讨环境中重金属离子与ENX的作用机理和环境效应提供了理论依据。 展开更多

关键词 荧光光谱法 依诺沙星 重金属离子 静态猝灭

原文传递

C型利钠肽及其受体在水牛卵泡中的表达分析 被引量：1

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作者 周文婷 孙龙飞 +5 位作者 尹娜 杜姗姗 赵鑫 代小丽 陆凤花 石德顺 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第11期2997-3002,共6页

为了探明C型利钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP)及其受体(natriuretic peptide receptor,NPR)在水牛卵泡中的表达模式,本研究首先采用实时荧光定量PCR技术检测水牛卵巢中利钠肽家族主要成员A型、B型、C型利钠肽(ANP、BNP、CNP)及... 为了探明C型利钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP)及其受体(natriuretic peptide receptor,NPR)在水牛卵泡中的表达模式,本研究首先采用实时荧光定量PCR技术检测水牛卵巢中利钠肽家族主要成员A型、B型、C型利钠肽(ANP、BNP、CNP)及其Ⅰ型、Ⅱ型受体(NPR1、NPR2)的mRNA表达情况,然后利用免疫组化技术对水牛卵泡中CNP及NPR2蛋白进行定位,最后利用实时荧光定量PCR技术检测颗粒细胞和卵丘细胞中CNP及NPR2的mRNA表达规律。结果显示,水牛卵巢主要表达CNP及NPR2,且在各级卵泡中均有表达,其中,CNP主要在壁层颗粒细胞中表达,NPR2主要在卵丘细胞中表达;颗粒细胞上CNP mRNA表达水平显著高于卵母细胞周围的卵丘细胞(P<0.05),而卵丘细胞上NPR2mRNA表达水平显著高于颗粒细胞(P<0.05)。综上所述,在利钠肽主要家族成员和受体中,CNP和NPR2在水牛卵巢中呈现强表达,CNP主要在壁层颗粒细胞中表达,而NPR2主要在卵母细胞周围的卵丘细胞中表达。 展开更多

关键词 C型利钠肽 利钠肽受体2 表达分析 水牛卵泡

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猪紧密连接蛋白1基因克隆及其shRNA片段的筛选

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作者 曹丽华 王萍 +4 位作者 郝文艳 代小丽 陈培芳 石德顺 李湘萍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第6期1405-1412,共8页

试验旨在筛选有效抑制猪紧密连接蛋白1(zonula occludens-1,ZO-1)基因表达的shRNA干扰片段,为后期利用RNA干扰技术深入了解ZO-1基因在猪卵母细胞成熟过程中的功能奠定基础。本研究首先克隆了猪ZO-1基因,并构建了其真核表达载体,而后筛... 试验旨在筛选有效抑制猪紧密连接蛋白1(zonula occludens-1,ZO-1)基因表达的shRNA干扰片段,为后期利用RNA干扰技术深入了解ZO-1基因在猪卵母细胞成熟过程中的功能奠定基础。本研究首先克隆了猪ZO-1基因,并构建了其真核表达载体,而后筛选了有效抑制ZO-1基因表达的shRNA干扰片段。结果表明,猪ZO-1基因编码区长度为3 036bp,多重序列比对结果显示,猪ZO-1基因核苷酸序列与牛、羊、马和人相应序列的同源性分别为88%、88%、87%和85%。构建的pDsRed-N1-ZO-1真核蛋白融合表达载体经脂质体法转染HEK293T细胞后,可观察到清晰的RFP红色荧光蛋白表达。将靶质粒与shRNA干扰质粒共转染HEK293T细胞48h后,与对照组相比,可观察到红色荧光表达得到抑制。实时荧光定量PCR结果显示,设计合成的2条shRNA对猪ZO-1基因表达均有抑制效果,其中ZO-1shRNA201的抑制效果显著高于ZO-1shRNA1276(77.8%和67.0%,P<0.05)。 展开更多

关键词 猪 ZO-1基因 克隆 SHRNA

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水牛GABA A型受体π亚基基因的克隆及其在乳腺组织中的表达

17

作者 郝文艳 陈培芳 +4 位作者 代小丽 王萍 吴大平 石德顺 李湘萍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第9期2412-2417,共6页

γ-氨基丁酸(GABA)是大脑中一种重要的抑制性递质,除与兴奋的传递有关外,还在内分泌组织中发挥着重要的作用。本研究对水牛GABA A型受体的π亚基基因(GABRP)CDS序列进行了克隆,并对其进行了生物信息学分析,同时应用实时荧光定量PCR和免... γ-氨基丁酸(GABA)是大脑中一种重要的抑制性递质,除与兴奋的传递有关外,还在内分泌组织中发挥着重要的作用。本研究对水牛GABA A型受体的π亚基基因(GABRP)CDS序列进行了克隆,并对其进行了生物信息学分析,同时应用实时荧光定量PCR和免疫组化技术分析了GABRP基因在水牛乳腺组织中的表达情况。结果表明,应用RT-PCR技术成功获得了广西本地水牛GABRP基因序列,长为1 401bp;BLAST比对结果显示,广西本地水牛的GABRP核苷酸序列与和河流型水牛的同源性为99%,GABRP在不同物种中具有较高的保守性;GABRP蛋白主要在水牛乳腺组织的腺泡上皮细胞中表达,GABRP基因在泌乳期及非泌乳期水牛乳腺组织中都有表达,且非泌乳期GABRP基因的表达显著高于泌乳期(P<0.05)。试验结果为进一步研究GABRP基因在水牛乳腺发育过程中的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 水牛 GABRP基因 乳腺组织

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喂养干预对新生儿疾病筛查采血成功率的影响 被引量：1

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作者 张琛 代小丽 《现代医药卫生》 2010年第9期1317-1318,共2页

目的:探讨喂养干预对新生儿采血成功率的影响。方法:327例行疾病筛查的正常足月新生儿按采血单、双日分为试验组(单日组)161例和对照组(双日组)166例。试验组进行喂养干预后足跟采血法采血,对照组不进行喂养干预行相同方法、部位采血。... 目的:探讨喂养干预对新生儿采血成功率的影响。方法:327例行疾病筛查的正常足月新生儿按采血单、双日分为试验组(单日组)161例和对照组(双日组)166例。试验组进行喂养干预后足跟采血法采血,对照组不进行喂养干预行相同方法、部位采血。比较两组新生儿采血难易度。结果:实验组采血容易占78.3%,对照组采血容易占44%,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:喂养干预可提高采血成功率和滤血血片质量。 展开更多

关键词 采血 喂养干预 疾病筛查 新生儿 成功率

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BP-4生产废液处理的工艺研究

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作者 张义军 杨政 +2 位作者 代小丽 黄珍珍 李德江 《山东化工》 CAS 2011年第5期4-6,共3页

通过研究,确定利用萃取精馏法分离BP-4生产废液的最佳工艺条件:以甲苯为萃取剂,四氟鲍尔环为填料,回流比控制在5∶1,萃取剂滴加速率为5∶1,萃取剂配比为2∶1。以此工艺路线分离所得的碳酸二甲酯纯度为98.8%,异丙醇纯度为98.5%。

关键词 萃取精馏 碳酸二甲酯 异丙醇

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浅析炼油企业的全员成本目标管理

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作者 王月 代小丽 《广东化工》 CAS 2015年第8期23-24,共2页

全员成本目标管理作为一种系统的企业成本管理手段,在中海石油惠州炼化分公司("惠炼")得到了全面实施。通过构建有效的组织管理体系,做到了组织有保障;通过推进信息化建设,做到信息有支撑;通过建立"三横四纵"核算... 全员成本目标管理作为一种系统的企业成本管理手段,在中海石油惠州炼化分公司("惠炼")得到了全面实施。通过构建有效的组织管理体系,做到了组织有保障;通过推进信息化建设,做到信息有支撑;通过建立"三横四纵"核算管理体系,做到了实施有措施。"惠炼"对企业成本进行全员、全过程、全方位管控的成效显著,为炼油企业成本竞争力的提高提供了一条可行之路。 展开更多

关键词 全员成本目标管理 炼油企业 成本竞争力

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