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树鼩角膜基质永生化细胞系的构建及其在病毒感染性方面的研究
1
作者 丁相荣 陈柳 +6 位作者 霍姝汭 杞梦迪 刘欣 王文广 李娜 代解杰 陆彩霞 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期610-619,共10页
目的建立树鼩永生化角膜基质细胞(corneal stromal cells,CSCs)系,并探讨其在病毒感染中的应用。方法利用组织块贴壁培养法分离培养树鼩原代CSCs,将携带SV40T基因的慢病毒转染细胞后,再挑取单克隆进行传代培养,传至50代以上进行形态学... 目的建立树鼩永生化角膜基质细胞(corneal stromal cells,CSCs)系,并探讨其在病毒感染中的应用。方法利用组织块贴壁培养法分离培养树鼩原代CSCs,将携带SV40T基因的慢病毒转染细胞后,再挑取单克隆进行传代培养,传至50代以上进行形态学观察并与40代细胞形态进行比较,波形蛋白(vimentin)和SV40T基因免疫荧光鉴定、核型鉴定、细胞增殖曲线测定。用单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus-1,HSV-1)(McKrae株)、寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)(GZ01株)、登革病毒Ⅱ型以及甲型流感病毒H1N1(PR8株)在该细胞上进行病毒感染实验。结果传至50代以上的树鼩永生化CSCs呈梭形,细胞形态结构与40代相比仍较好。vimentin和SV40T基因免疫荧光表达阳性。增殖曲线结果显示:细胞生长旺盛,第4~5天时处于对数生长期。原代细胞核型的染色体数稳定为62条,而永生化细胞第21、56代突变为64条且保持稳定。病毒感染实验显示:树鼩永生化CSCs对HSV-1(McKrae株)、ZIKV(GZ01株)、登革病毒Ⅱ型以及H1N1(PR8株)病毒敏感,产生较高感染滴度,分别为1.32×105、5.62×106、2.69×107、7.76×104CCID50/mL。结论成功建立了树鼩永生化CSCs细胞系,提示该细胞系可用于单纯疱疹病毒、寨卡病毒、登革病毒和甲型流感病毒感染眼角膜疾病的作用机制及抗病毒药物的研究。 展开更多
关键词 树鼩 角膜基质细胞 永生化 病毒扩增
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树鼩脑微血管内皮永生化细胞系的建立及最适D-半乳糖浓度诱导BMECs衰老细胞模型的探讨
2
作者 陈柳 邱敏 +4 位作者 丁相荣 霍姝汭 王文广 陆彩霞 代解杰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期337-345,共9页
目的建立树鼩永生化脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs),明确D-半乳糖对BMECs衰老的影响,探索其潜在机制。方法用携带SV40T基因的慢病毒转染BMECs,传至50代后进行形态观察、生长曲线测定以及免疫荧光和核... 目的建立树鼩永生化脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs),明确D-半乳糖对BMECs衰老的影响,探索其潜在机制。方法用携带SV40T基因的慢病毒转染BMECs,传至50代后进行形态观察、生长曲线测定以及免疫荧光和核型鉴定;再用不同浓度D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导BMECs,通过细胞增殖实验确定最适诱导条件,用衰老相关β半乳糖苷酶染色分析细胞衰老情况,Western Blot检测衰老相关蛋白p53的表达水平,超氧化物歧化酶和脂质氧化检测试剂盒检测细胞内氧化应激水平。结果永生化的细胞生长状态较好,不同代次的细胞形态一致,单个细胞呈短梭形或多角形,整体呈典型的铺路石状;细胞生长曲线显示细胞数量在第2~5天时处于对数生长期,在第6天时达到高峰,之后缓慢增长进入平台期;免疫荧光显示该细胞特异蛋白vWF和CD31及永生化基因SV40T为阳性;细胞核型结果显示永生化细胞染色体数目与滇西亚种树鼩的染色体数量相符;D-gal诱导BMECs抑制细胞增殖,有时间和浓度依赖性;实验组,即浓度为10 g/L的D-gal诱导48 h的BMECs,β-半乳糖苷酶染色阳性明显增多、衰老相关蛋白p53显著增多、细胞内SOD酶活性降低和MDA含量增多。结论成功构建树鼩永生化脑微血管内皮细胞系,10 g/L的D-gal是建立永生化BMECs衰老模型的适合浓度,D-gal在体外促进细胞衰老可能是通过促进氧化应激水平、抑制细胞增殖来实现的。 展开更多
关键词 树鼩 脑微血管内皮细胞 永生化 D-半乳糖 衰老模型
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树鼩眼球组织形态学结构特征与比较分析 被引量：2
3
作者 邱敏 陈柳 +7 位作者 霍姝汭 丁相荣 仝品芬 李娜 代解杰 郝佩琪 高家红 陆彩霞 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期66-74,共9页
目的获得树鼩眼球组织形态学结构特征,并比较树鼩、恒河猴和人类眼球组织解剖学的异同点,为利用树鼩建立眼部相关疾病模型提供必要的组织学基础数据。方法制作树鼩和恒河猴眼球常规石蜡切片,HE染色后进行分析比较。结果树鼩眼球主要由... 目的获得树鼩眼球组织形态学结构特征,并比较树鼩、恒河猴和人类眼球组织解剖学的异同点,为利用树鼩建立眼部相关疾病模型提供必要的组织学基础数据。方法制作树鼩和恒河猴眼球常规石蜡切片,HE染色后进行分析比较。结果树鼩眼球主要由晶状体和眼球壁组成。眼球壁分3层,由外向内依次为纤维膜、血管膜和视网膜三层。纤维膜前方1/6为角膜,后5/6为巩膜,两者交界处有一移行区域为角巩膜缘;血管膜是眼球壁的中间层,由疏松结缔组织、丰富的血管和色素细胞组成,自前向后分为虹膜、睫状体和脉络膜;视网膜是眼球壁的最内层,呈典型10层结构。树鼩眼球组织学结构组成与恒河猴眼球及人类眼球组成一致,组织各层占比大致相同,不同之处是树鼩巩膜上皮含有黑色素细胞,视网膜各层组织占比与人类不同。结论树鼩眼球组织结构与非人灵长类或人类类似,组织形态大致相同,具备用于建立人类眼科相关疾病动物模型的潜力,以阐明相应眼科疾病致病机制。 展开更多
关键词 树鼩 恒河猴 眼球 组织学结构
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甲型流感病毒对人与实验动物神经系统影响的研究进展 被引量：1
4
作者 丁相荣 霍姝汭 代解杰 《实验动物与比较医学》 CAS 2023年第2期180-185,共6页
流感作为一种高度传染性疾病,主要影响呼吸系统,常导致肺部并发症,但它也会导致多种罕见却严重的神经系统并发症,包括格林-巴利综合征、横贯性脊髓炎、脑膜脑炎等。近年来,多个国家和地区相继报告了甲型流感病毒引起的神经系统并发症病... 流感作为一种高度传染性疾病,主要影响呼吸系统,常导致肺部并发症,但它也会导致多种罕见却严重的神经系统并发症,包括格林-巴利综合征、横贯性脊髓炎、脑膜脑炎等。近年来,多个国家和地区相继报告了甲型流感病毒引起的神经系统并发症病例,逐渐引起国际关注。然而该并发症的发病机制尚不清楚,相关病例及动物实验科学研究较少,无特定疗法。本文围绕人与实验动物感染甲型流感病毒后神经系统并发症的研究进展进行归纳总结,以期对甲型流感病毒引起的神经系统性疾病有一个全面的认识和理解。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 神经系统并发症 动物实验
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树鼩视网膜微血管内皮细胞永生化细胞株的建立及鉴定
5
作者 霍姝汭 邱敏 +3 位作者 王文广 陆彩霞 罕园园 代解杰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期471-477,共7页
目的建立树鼩视网膜来源的微血管内皮细胞的体外分离培养技术以及永生化细胞株,为体外利用树鼩视网膜微血管内皮细胞开展相关研究提供新的实验材料。方法利用Ⅱ型胶原酶、分散酶和DNaseⅠ酶消化法分离培养出原代视网膜微血管内皮细胞,... 目的建立树鼩视网膜来源的微血管内皮细胞的体外分离培养技术以及永生化细胞株,为体外利用树鼩视网膜微血管内皮细胞开展相关研究提供新的实验材料。方法利用Ⅱ型胶原酶、分散酶和DNaseⅠ酶消化法分离培养出原代视网膜微血管内皮细胞,利用差速消化法纯化内皮细胞,然后利用携带SV40T基因的慢病毒转染细胞,再挑取单克隆后进行传代培养。对传至50代以上的细胞进行形态学观察、免疫荧光鉴定以及核型鉴定。结果采用混合酶消化法能够分离获得微血管内皮细胞,纯化后的细胞呈不规则多角形和梭形。经慢病毒转染后的细胞传代培养后细胞形态一致,到第50代时细胞形态结构仍较好。细胞免疫荧光结果显示标志性蛋白VWF、CD34、Claudin1、ZO-1和永生化SV40T表达阳性。生长曲线结果显示:细胞生长旺盛,第2~4天时处于对数生长期,第4天进入平台期。细胞核型结果显示:染色体数与树鼩染色体相同,即所获取的细胞为永生化的树鼩视网膜微血管内皮细胞。结论成功建立的树鼩视网膜微血管内皮细胞永生化细胞株具有较好的形态结构与功能,为视网膜病变及眼科相关疾病的研究提供了新的实验材料。 展开更多
关键词 树鼩 视网膜微血管内皮细胞 分离培养 永生化细胞株
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人工饲养条件下恒河猴血液学、血液生化正常参考值测定及分析 被引量：29
6
作者 代解杰 唐东红 +4 位作者 鲁帅尧 匡德宣 杨帆 程树军 黄韧 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2000年第4期224-230,共7页
目的测定人工饲养条件下１０４只健康恒河猴的血液学、血液生化正常参考值，并分析不同性别、不同年龄阶段（青幼年组： ３～４岁，成年组： ５～ １０岁，老年组： １１～２５岁）恒河猴的血液学、血液生化值的差异及相互关系。方法应... 目的测定人工饲养条件下１０４只健康恒河猴的血液学、血液生化正常参考值，并分析不同性别、不同年龄阶段（青幼年组： ３～４岁，成年组： ５～ １０岁，老年组： １１～２５岁）恒河猴的血液学、血液生化值的差异及相互关系。方法应用全自动血液细胞分析仪和全自动血液生化分析仪，测定及分析非麻醉状态下健康恒河猴血液学和血液生化正常值。结果血液学值中较明显低（Ｐ＜０．０５）的项目为ＭＥＤ。血液生化值中■猴比■猴明显低（Ｐ＜０．０１）的项目有ＡＬＴ、ＡＬＰ、ＧＧＴ、ＣＨＯＬ、ＡＰＯＡ、ＨＤＬ、ＬＤＬ、Ｐ３＋、ＢＵＮ，较明显低（Ｐ＜０．０５）的项目为ＡＬＢ。较明显高（Ｐ＜０．０５的项目为ＵＡ。各年龄组之间的分析如下：血液学值中ＲＤＷ值为青幼年组比成年组及老年组均明显低（Ｐ＜０．０１），ＭＥＤＩＡＮ值为成年组比青幼年组较明显高（Ｐ＜０．０５），血液生化值中青幼年组比成年组及老年组均明显高（Ｐ＜０．０１）的项目有ＡＬＴ、ＡＬＰ、ＧＧＴ、Ｐ３＋，青幼年组比成年组明显高（Ｐ＜０．０１）的项目为ＢＵＮ、ＡＬＰ、ＡＳＴ、，青幼年组比老年组明显高（Ｐ＜０．０１）的项目为ＣＫ、ＴＦ；成年组比老年组明显低（Ｐ＜０．０１）的项目为ＣＲＥＡＴ，较明显低? 展开更多
关键词 血液学 幼年 老年 恒河猴 血液生化值 成年 正常参考值 人工饲养条件 ALP TF
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人工饲养恒河猴麻醉与非麻醉状态下血液学、血液生化、血流变指标的测定与比较 被引量：7
7
作者 代解杰 孙晓梅 +4 位作者 唐东红 仝品芬 江勤芳 李慧琳 黄韧 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第4期242-246,共5页
目的　测定人工饲养条件下 48只健康恒河猴在非麻醉状态下及 30只健康恒河猴在麻醉状态下的血液生化、血液常规、血液流变学指标 ,并分析两种状态下恒河猴血液生化、血液常规、血液流变值的差异及相互关系。方法　应用全自动血液细胞分... 目的　测定人工饲养条件下 48只健康恒河猴在非麻醉状态下及 30只健康恒河猴在麻醉状态下的血液生化、血液常规、血液流变学指标 ,并分析两种状态下恒河猴血液生化、血液常规、血液流变值的差异及相互关系。方法　应用全自动血液细胞分析仪和全自动血液生化分析仪 ,自动清洗旋转型粘度计测定及分析麻醉和非麻醉状态下健康恒河猴血液生化、血液常规、血液流变值。结果　血液生化值 :麻醉组比非麻醉组明显低 (P <0 .0 1)的项目有GGT、AST、CREAT、TBIL、DBIL、P3 +、TF ;较明显低 (P <0 .0 5 )的项目有ALT、ALP、LDH、HBDH ;明显高 (P <0 .0 1)的项目有UA、Ca2 +、CK -MB、ALB ,较明显高 (P <0 .0 5 )的项目有TPROT。血常规值 :麻醉组比非麻醉组明显低 (P <0 .0 1)的项目有RBC、Hct、MCV、MPV、RDW、NEUTRO ,明显高 (P <0 .0 1)的项目有MCH、MCHC、PLT、LYM、ME DIAN。血液流变值 :麻醉组比非麻醉组明显低 (P <0 .0 1)的项目有全血低切粘度 ,全血中切粘度 ,全血高切粘度 ,血浆粘度 ,红细胞压积 ,还原低切 ,血沉K值 ,聚集指数 ;明显高 (P <0 .0 1)的项目有变形指数 ,电泳指数。结论　本文测定并比较了人工饲养条件下健康恒河猴在麻醉和非麻醉状态下血液生化、血液常规、血液流变值 。 展开更多
关键词 血液生化值 麻醉 恒河猴 血液流变 血液常规 全血 健康 人工饲养条件 动物生理 TF
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实验恒河猴血液流变学指标测定 被引量：2
8
作者 代解杰 孙晓梅 +4 位作者 江勤芳 仝品芬 杨帆 程树军 黄韧 《中国血液流变学杂志》 CAS 2000年第2期84-86,共3页
对７６只健康恒河猴全血粘度、血浆粘度、红细胞比积及纤维蛋白原 等血液流变学指标进行测定，并比较不同性别、不同年龄组间的差异。结果表明：恒 河猴血浆粘度、红细胞比积略高于人正常值，其余指标均在人的正常值范围内，雌、 雄间... 对７６只健康恒河猴全血粘度、血浆粘度、红细胞比积及纤维蛋白原 等血液流变学指标进行测定，并比较不同性别、不同年龄组间的差异。结果表明：恒 河猴血浆粘度、红细胞比积略高于人正常值，其余指标均在人的正常值范围内，雌、 雄间无差异，但全血粘度和红细胞比积有随着年龄增大而逐渐递增的趋势。老年组全血粘度升高较青少年组明显（ｐ＜０．０５）。 展开更多
关键词 恒河猴 血液流变学 全血粘度 血浆粘度
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人工饲养条件下恒河猴病理分析的研究 被引量：6
9
作者 代解杰 谢晋 和占龙 《中国实验动物学杂志》 1999年第1期34-38,共5页
作者对本所近６年（１９９１～１９９７年）来饲养中死亡的３２８例恒河猴进行尸体剖析，临床病理分析结果表明：死亡病因统计，呼吸系统病最高（３９６％），消化系统为第二位（２７１％），合并症次之（１４０％）；全年中１～... 作者对本所近６年（１９９１～１９９７年）来饲养中死亡的３２８例恒河猴进行尸体剖析，临床病理分析结果表明：死亡病因统计，呼吸系统病最高（３９６％），消化系统为第二位（２７１％），合并症次之（１４０％）；全年中１～４月份为猴子死亡高峰，占全年死亡率的４３４％。按死亡猴年龄统计，幼年猴中雄性猴死亡率（６４２％）高于雌性猴（３５８％），青年猴中雄性猴死亡率（５６６％）略高于雌性猴（４３４％），但成年猴中雌性猴死亡率（７３４％）高于雄性猴（２６６％）。本文根据恒河猴饲养的环境条件，死亡猴的病理变化，对动物疾病的观察、诊断、治疗及预防进行分析和讨论。 展开更多
关键词 死亡率 恒河猴 诊断 治疗 临床病理分析 幼年 死亡病因 人工饲养条件 动物疾病 环境条件
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抗黄体酮联合Aromatase抑制剂或iNOS终止恒河猴妊娠 被引量：4
10
作者 代解杰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第S1期28-29,共2页
[目的]评价抗黄体酮(mifepristone)联合Aromatase抑制剂(letrozole或aminoglutethimide)或iNOS抑制剂(aminoguandine)是否能有效终止恒河猴早期妊娠。[方法]将30只猴子随机分为5组(治疗组每组6只,对照组6只),并在妊娠30,31和32天进行如... [目的]评价抗黄体酮(mifepristone)联合Aromatase抑制剂(letrozole或aminoglutethimide)或iNOS抑制剂(aminoguandine)是否能有效终止恒河猴早期妊娠。[方法]将30只猴子随机分为5组(治疗组每组6只,对照组6只),并在妊娠30,31和32天进行如下处理:对照组,每只动物1ml安慰剂;A组,Mifepristone(1mg/kg,sc.);B组,Mifepristone(sc.)+Letrozole(2.5mg/只sc.);C组,Mifepristone(1mg/kg,sc.)+aminoglute-chimide(50mg/kgsc.,bid);D组,Mifepristone(1mg/kg,sc.)+aminoguanidine(150mg/kg,sc.,bid)。所有妊娠猴在妊娠29天通过超声波确认。[结果]在B、C、D组,所有的动物的妊娠都在妊娠早期被终止(6/6)。A组和对照组的妊娠终止率分别为3/6和2/6。同时,联合用药能够有效排空子宫腔和减少出血。[结论]该处理能有效地终止恒河猴早期妊娠。联合用药比用于女人的妊娠治疗更有效,并减少了流血时间,或许可以代替目前的终止妊娠的医疗方法。 展开更多
关键词 Antiprogestin Aromatase and Nitric Oxide Inhibitors COMBINATIONS early pregnancy Macaca Mulatta(rhesus monkey)
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EV71可感染幼龄中缅树鼩 被引量：27
11
作者 王文广 黄晓燕 +3 位作者 徐娟 孙晓梅 代解杰 李琦涵 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期7-13,共7页
树鼩是灵长类动物的近亲,且具有体型小、繁殖周期短、饲养管理成本低等优点,长期以来被认为有望替代灵长类动物用于人类疾病的动物模型研究。该文研究了肠道病毒EV71对幼年中缅树鼩的感染特点,探索建立EV71感染树鼩动物模型及替代灵长... 树鼩是灵长类动物的近亲,且具有体型小、繁殖周期短、饲养管理成本低等优点,长期以来被认为有望替代灵长类动物用于人类疾病的动物模型研究。该文研究了肠道病毒EV71对幼年中缅树鼩的感染特点,探索建立EV71感染树鼩动物模型及替代灵长类动物的可行性。实验分别采用灌胃、滴鼻和尾静脉注射3种方式,感染3月龄树鼩,定期观察动物临床症状和血常规变化和定期采集血液和粪便样品,并使用中和抗体试验、reverse transcription-PCR(RT-PCR)和Real-TimePCR等技术,检测相关样品中和抗体效价、病毒核酸及载量变化。结合组织病理学检查,分析感染病变特点。研究结果发现,实验组树鼩体温在第4天前后开始升高,白细胞、淋巴细胞也有类似趋势;3种攻毒方式均可检测到病毒载量,峰值出现在第10天前后,灌胃途径尤为明显,血清的最大中和抗体效价为1:16。感染EV71病毒的树鼩2周左右出现急性松弛性瘫痪,大体解剖发现伴有尿潴留症状,组织病理学检查发现在脑、肺、肠、脾脏、肾脏等部位发生病变。结果表明,EV71病毒通过灌胃、滴鼻和静脉注射3种方式均可以感染中缅树鼩,并使之出现神经系统及相关病变,该实验为将来研究EV71感染树鼩致病机理、建立手足口病树鼩动物模型奠定了理论基础。 展开更多
关键词 手足口病 EV71 中缅树鼩 动物模型
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野生中缅鼩病毒携带情况的初步调查 被引量：16
12
作者 王新兴 李婧潇 +3 位作者 王文广 孙晓梅 何春艳 代解杰 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期66-69,共4页
病毒学检测和监测是树鼩实验动物化和质量控制的重要标准和依据,而野生中缅树鼩是否携带人兽共患病毒鲜见报道。本研究采用酶联免疫吸附(ELISA)方法,对来源于云南昆明市城郊青龙峡地区的野生树鼩是否携带单纯疱疹病毒、轮状病毒、流感... 病毒学检测和监测是树鼩实验动物化和质量控制的重要标准和依据,而野生中缅树鼩是否携带人兽共患病毒鲜见报道。本研究采用酶联免疫吸附(ELISA)方法,对来源于云南昆明市城郊青龙峡地区的野生树鼩是否携带单纯疱疹病毒、轮状病毒、流感病毒、柯萨奇病毒、甲肝病毒、乙肝病毒、丙肝病毒、丁肝病毒、登革热病毒、出血热病毒和麻疹病毒等11种常见病毒进行筛查。结果表明,在已筛查的60只野生中缅树鼩中,可检测到单纯疱疹病毒和柯萨奇病毒,其血清抗体阳性比例分别为36.7%(22/60)和1.67%(1/60),而在粪便中仅检测到轮状病毒,其抗原阳性为6.7%(4/60),未检测到其他病毒,初步显示了野生树鼩自然状态下携带病毒的状况。为此,建议将单纯疱疹病毒、柯萨奇病毒和轮状病毒列为普通级树鼩病毒质量控制的首检项目,进一步大样本筛查将显示是否将其他病毒列为必检项目。 展开更多
关键词 中缅树鼩 病毒监测 酶联免疫吸附试验
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血管新生调节因子VEGF及其受体在恒河猴正常妊娠和药物流产胎盘中的表达 被引量：11
13
作者 高红军 代解杰 +2 位作者 王红星 林海燕 王红梅 《中国计划生育学杂志》 北大核心 2005年第6期356-359,共4页
目的:研究血管新生调节因子VEGF及其受体Flt-1、KDR在恒河猴正常妊娠和药物流产胎盘组织中的表达。方法:用免疫组化方法检测妊娠30天的恒河猴上述蛋白在胎盘中的表达。结果:VEGF蛋白主要表达于胎盘绒毛和子宫内膜,在母胎界面和子宫内膜... 目的:研究血管新生调节因子VEGF及其受体Flt-1、KDR在恒河猴正常妊娠和药物流产胎盘组织中的表达。方法:用免疫组化方法检测妊娠30天的恒河猴上述蛋白在胎盘中的表达。结果:VEGF蛋白主要表达于胎盘绒毛和子宫内膜,在母胎界面和子宫内膜血管中显著高表达;KDR蛋白的表达模式与VEGF类似;Flt-1蛋白在两组胎盘中的表达无显著差异。VEGF和KDR在药物流产胎盘中的表达量明显低于正常妊娠胎盘。结论:VEGF、Flt-1及KDR在恒河猴妊娠早期参与子宫内膜和胎盘发育过程中的血管新生,在胎盘绒毛的浸润以及腺上皮细胞分化及其分泌等过程中也发挥着重要作用;流产药物可能通过下调VEGF和KDR蛋白的表达,影响了血管发生和胎盘发育,增加了流产机会。 展开更多
关键词 血管新生调节因子 VEGF 药物流产 正常妊娠 恒河猴 受体FLT-1 免疫组化方法 子宫内膜血管 上皮细胞分化 胎盘绒毛 KDR 胎盘组织 母胎界面 表达模式 发育过程 妊娠早期 流产药物 胎盘发育 血管发生 R蛋白 高表达 表达量
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STZ诱发实验恒河猴糖尿病性视网膜并发症模型的建立 被引量：9
14
作者 唐东红 代解杰 +5 位作者 蒋禄芝 孙晓梅 匡德宣 高家红 江勤芳 张学宁 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2002年第3期173-176,共4页
目的　建立糖尿病性视网膜并发症 (DiabeticRetinopathy ,DR)动物模型。方法　本研究选用 4只健康成熟的雄性恒河猴分别以剂量为 6 0mg kg、4 5mg kg静脉一次注射及 30mg kg静脉二次注射 (中间间隔 15d)链脲佐菌素 (Streptozotocin ,STZ... 目的　建立糖尿病性视网膜并发症 (DiabeticRetinopathy ,DR)动物模型。方法　本研究选用 4只健康成熟的雄性恒河猴分别以剂量为 6 0mg kg、4 5mg kg静脉一次注射及 30mg kg静脉二次注射 (中间间隔 15d)链脲佐菌素 (Streptozotocin ,STZ)。结果　使用不同剂量的STZ注射恒河猴 ,分别造成了胰岛素依赖性糖尿病 (InsulinDepen dentDiabetesMellitus ,IDDM)及慢性持续性高血糖症 (StateofChronicHyperglycemia,SCH)两种类型的模型 ,从而诱导出不同程度的DR。眼底荧光造影结果显示∶用药后 6 3～ 91d4只实验猴均出现不同程度的视网膜病 ,分别显示早期眼底微血管动脉扩张 ,视网膜出血瘤 ,微血管瘤及新生血管、晚期白内障等。结论　本研究所建立的糖尿病性视网膜并发症模型 ,对于进一步研究糖尿病及其并发症的发病机理 。 展开更多
关键词 STZ 诱发 实验恒河猴 糖尿病 并发症 模型 视网膜疾病
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树鼩呼肠孤病毒的分离鉴定 被引量：7
15
作者 徐娟 黄晓燕 +5 位作者 李晓飞 王文广 殷安国 夏雪山 孙晓梅 代解杰 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期116-120,共5页
致病性病毒严重危害树鼩（treeshrew,Tupaia）生命健康,但却鲜见有关树鼩自然感染病毒的报道。该研究采集6份因腹泻死亡的野生树鼩粪便,用Vero细胞进行病毒分离,72h后细胞发生病变,特征为颗粒增多、破碎、变圆固缩、拉网及脱落等;电镜... 致病性病毒严重危害树鼩（treeshrew,Tupaia）生命健康,但却鲜见有关树鼩自然感染病毒的报道。该研究采集6份因腹泻死亡的野生树鼩粪便,用Vero细胞进行病毒分离,72h后细胞发生病变,特征为颗粒增多、破碎、变圆固缩、拉网及脱落等;电镜观察显示该病毒为球形,双层衣壳,完整直径-75nm。纯化病毒经核酸PAGE电泳后呈现10个核酸节段,并为典型的3：3：4排列。哺乳动物呼肠孤病毒（mammalian orthoreovirus,MRV）L1基因保守区RT-PCR检测、序列分析及进化树构建结果表明,该病毒株属于MRV,且与来源于蝙蝠的呼肠孤病毒分离株（T3/Bat/Germany/342/08）同源性最高。MRV是人兽共患病病毒,该实验首次从树鼩体内成功分离到MRV,对今后研究制定实验树鼩病毒学控制标准具有指导意义,同时为有效预防该病毒在树鼩与人类之间传播提供了实验依据。 展开更多
关键词 树鼩 呼肠孤病毒 分离 鉴定
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树鼩CD3ε全长编码序列的克隆及分子特征分析 被引量：5
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作者 李乙江 高跃东 +7 位作者 郭彦 陆彩霞 黄京飞 夏雪山 代解杰 范泉水 李作生 张华堂 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期483-489,共7页
树鼩可作为人类疾病的良好模型,但缺乏对其免疫功能研究的基本标志和单克隆抗体。该研究应用RT-PCR技术,分别从3只树鼩的肝脏、脾脏和血液中克隆了CD3ε全长编码序列并用Discovery Studio等软件对其分子特征进行了分析。结果显示,树鼩CD... 树鼩可作为人类疾病的良好模型,但缺乏对其免疫功能研究的基本标志和单克隆抗体。该研究应用RT-PCR技术,分别从3只树鼩的肝脏、脾脏和血液中克隆了CD3ε全长编码序列并用Discovery Studio等软件对其分子特征进行了分析。结果显示,树鼩CD3εcDNA的开放阅读框全长582bp,编码193个氨基酸。树鼩与其他哺乳动物的CD3ε蛋白整体结构近似,与人和恒河猴CD3ε的亲缘关系较近,胞内域与跨膜域高度保守,但胞外域出现2个潜在的糖基化位点,表面电荷亦存在差异。该研究为今后制备树鼩CD3单克隆抗体及功能研究奠定初步的基础。 展开更多
关键词 树鼩 CD3ε CDNA 克隆 结构 功能 单克隆抗体
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水迷宫实验中不同性别树鼩学习记忆能力的比较 被引量：10
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作者 陆彩霞 罕园园 +2 位作者 仝品芬 江勤芳 代解杰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第5期74-76,79,共4页
目的研究雌雄树鼩空间学习和记忆能力的差异。方法随机选择自繁F1代树鼩20只(雄11只,雌9只),在相同条件下进行8 d的水迷宫实验,包括前7 d的定位航行实验和第8天的空间探索实验。结果定位航行实验中雌雄逃避潜伏期、游泳总路程差异无显著... 目的研究雌雄树鼩空间学习和记忆能力的差异。方法随机选择自繁F1代树鼩20只(雄11只,雌9只),在相同条件下进行8 d的水迷宫实验,包括前7 d的定位航行实验和第8天的空间探索实验。结果定位航行实验中雌雄逃避潜伏期、游泳总路程差异无显著性(P>0.05),但不同时间水平差异有显著性(P<0.05);平均游泳速度雌雄差异无显著性(P>0.05)。空间探索实验中目标象限游泳时间和总时间之比、目标象限游泳路程和总路程之比雌雄差异无显著性(P>0.05);穿越目标象限次数和搜索策略雌雄差异有显著性(P<0.05)。结论水迷宫实验中树鼩在空间学习能力上雌雄无差异,但在空间探索实验中雄性的表现优于雌性。 展开更多
关键词 树鼩 水迷宫 性别 学习能力 记忆能力
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树鼩模型在人类病毒性疾病研究中的应用进展 被引量：10
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作者 殷安国 匡德宣 +4 位作者 李晓飞 张媛 孙晓梅 夏雪山 代解杰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第2期86-89,共4页
由于树鼩在进化上接近于灵长类动物,在生理、生化及解剖学等生物学特性方面与人类有着相似之处,树鼩得到越来越多的关注,研究人员运用与其他动物相比具有多种优势的树鼩建立了一系列的疾病模型,如病毒类疾病、神经系统、肿瘤等,本文着... 由于树鼩在进化上接近于灵长类动物,在生理、生化及解剖学等生物学特性方面与人类有着相似之处,树鼩得到越来越多的关注,研究人员运用与其他动物相比具有多种优势的树鼩建立了一系列的疾病模型,如病毒类疾病、神经系统、肿瘤等,本文着重就树鼩在人类病毒疾病方面的研究进展进行概述。 展开更多
关键词 树鼩 病毒 动物模型
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嗜血杆菌属CODEHOP PCR检测方法的建立及在树鼩检测中的应用 被引量：3
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作者 邢进 冯育芳 +3 位作者 岳秉飞 贺争鸣 孙晓梅 代解杰 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期994-1000,共7页
目的建立树鼩中嗜血杆菌的CODEHOP PCR快速检测方法,为树鼩微生物质量控制提供参考。方法应用CODEHOP在线简并引物设计工具,比对NCBI中6株嗜血杆菌的外膜蛋白序列设计简并引物。通过4株嗜血杆菌标准菌株和24株它属菌株进行特异性和敏感... 目的建立树鼩中嗜血杆菌的CODEHOP PCR快速检测方法,为树鼩微生物质量控制提供参考。方法应用CODEHOP在线简并引物设计工具,比对NCBI中6株嗜血杆菌的外膜蛋白序列设计简并引物。通过4株嗜血杆菌标准菌株和24株它属菌株进行特异性和敏感性评价,将建立CODEHOP PCR检测方法,应用于树鼩嗜血杆菌的检测。结果简并引物HF1/HR8和HF3/HR3扩增标准菌株副鸡嗜血杆菌(ATCC 29545)、溶血嗜血杆菌(ATCC 33390)、流感嗜血杆菌(ATCC33391)、副流感嗜血杆菌(ATCC 33392)的目的片段分别为506bp^535bp和344bp^390bp,经测序和NCBI Blast比对,结果准确。两对引物组合,能够有效的区分嗜血杆菌属菌株与它属菌株,检测限最低可达2.1pg/μL。在受试的野生树鼩呼吸道样本中嗜血杆菌阳性率为33.3%(20/60)。结论所建立的方法具有较好的特异性和敏感性,操作简便,能够用于动物样品的嗜血杆菌检测。 展开更多
关键词 嗜血杆菌 CODEHOP PCR 树鼩 简并引物 检测
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野生树鼩可培养细菌和真菌携带情况的调查 被引量：20
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作者 邢进 冯育芳 +4 位作者 付瑞 岳秉飞 孙晓梅 代解杰 贺争鸣 《实验动物科学》 2012年第3期34-38,共5页
目的对树鼩携带的可培养微生物群系进行初步调研,为制定树鼩的微生物学等级标准提供依据。方法采集61只野生树鼩呼吸道分泌物、肠道内容物和体表毛发,接种于多种培养基进行细菌分离培养,并进行生化、药敏和16SrRNA测序鉴定。结果在所采... 目的对树鼩携带的可培养微生物群系进行初步调研,为制定树鼩的微生物学等级标准提供依据。方法采集61只野生树鼩呼吸道分泌物、肠道内容物和体表毛发,接种于多种培养基进行细菌分离培养,并进行生化、药敏和16SrRNA测序鉴定。结果在所采集的样品中共分离和检测到可培养的16个科32个属56种细菌及10个属的11种真菌;以肠杆菌属、葡萄球菌属、链球菌属和支原体属的携带率最高。其中常见病原菌有甲型副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、嗜肺巴斯德杆菌、肺炎链球菌、空肠弯曲菌、弗劳地柠檬酸杆菌、鲍氏志贺菌和支原体等。结论树鼩携带细菌和真菌的属种丰富、复杂,存在着多种人兽共患疫病的病原微生物。 展开更多
关键词 树鼩 细菌 真菌 鉴定
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